Life-iLab/李记生物 品牌
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产品描述
外泌体浓缩液是一款适用于大体积外泌体样本的高效浓缩试剂,能快速处理大体积样本。浓缩后的样本可用于后续的外泌体分离纯化、RNA 提取、蛋白提取等实验。
本产品主要用于尿液和细胞培养上清中的外泌体浓缩,但浓缩后的外泌体不适合直接进行 NTA 粒径分析、Western Blot、qPCR、NGS 测序、外泌体标记或蛋白质质谱分析等。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
外泌体浓缩液 | AC25L141 | 50mL |
外泌体浓缩液 | AC25L142 | 100mL |
运输与保存
常温运输。4℃保存,有效期12个月。
使用方法
自备仪器、试剂与耗材:高速冷冻离心机、50mL离心管、无菌PBS。
1. 样品预处理
(1) 去除细胞:对含细胞样品,4℃,300g,离心 5min,将上清转移至新离心管;无细胞样品可跳过此步骤。
(2) 去除细胞及细胞碎片:4℃,2,000g,离心10min,将上清转移至新离心管。
(3) 去除大体积颗粒:将步骤(2)获得的上清液在4℃,14,000g,离心 30min,取上清转移至新离心管。或选择替代方法:将步骤(2)的上清液通过 0.2μm 微孔滤膜过滤,收集滤液。
2. 大体积外泌体样本浓缩
(1) 将预处理后的样品24mL加入50mL离心管,加入6mL外泌体浓缩液,上下颠倒充分混匀。注:样本体积与外泌体浓缩液的比例为4:1,可按此比例调整样本体积。为保证效果,推荐浓缩样本体积不少于24mL。
(2) 室温孵育60 min(快速流程);如时间允许,推荐在 4℃ 过夜孵育(高回收流程)。
(3) 在4℃、12,000g 离心 30min,弃去上清。小心吸弃或倒出上清后,用200μL移液器尽量吸净残余上清。
3. 外泌体样本重悬
(1) 向沉淀中加入适量无菌 PBS,用移液器轻柔上下吹打,充分混匀。注:无菌PBS的加入体积可灵活调整,但浓缩倍数不建议超过 50倍,推荐浓缩24-30倍。若将本试剂盒用于外泌体分离,按细胞培养上清/尿液样本10mL,加入100μL无菌PBS进行重悬。
(2) 待外泌体样本溶解后,可用于外泌体分离纯化、RNA 提取、蛋白提取等后续实验。注:如不立即进行后续实验,可将溶解后的样本置于-80℃保存(若24h内进行实验,可4℃保存)。如进行外泌体分离纯化,可选择沉淀法外泌体分离产品 (货号:AC15L412) ,SEC法外泌体分离产品 (货号:AC25L434) ,或磁珠法外泌体分离产品 (货号:AC25L422) 或 (货号:AC25L423)。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 使用过程中,尽量在无菌环境开启瓶盖,减少对试剂的污染。
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本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。