产品描述

本试剂盒包含创新性的 Exosome Tracker，一种专用于外泌体荧光标记的示踪染料探针。Exosome Tracker 的标记效率高于其他探针，采用共价方式嵌入胞外囊泡的双层膜结构，优于亲脂或疏水性染料，避免自组装纳米粒子引起的信号干扰，从而提升标记效率。Exosome Tracker可简单有效的进行体外外泌体的跟踪和监测，因其具有较长的体内半衰期，标记后的外泌体可用于动物体内示踪实验。其激发光波长为 580 nm，发射光波长为 664 nm。

订购信息

产品组分

运输与保存

蓝冰运输。-20℃避光保存，有效期12个月。

使用方法

自备试剂与耗材：DAPI、PBS(新鲜配制，无菌)、共聚焦专用平皿、缓冲液置换试剂盒或其他缓冲液置换产品。

1.    试剂准备

Exosome Tracker 使用前需从 -20℃ 取出，避光解冻备用。注：Exosome Tracker 为 200×浓度，收到后建议分装避光保存于 -20℃。

2.    标记

(1)  标记外泌体：按 1:200 (v/v) 比例将 Exosome Tracker添加到外泌体溶液中，37℃避光孵育1 h，轻轻上下颠倒以确保染色均匀。

(2)  去除游离Exosome Tracker：加入 0.1倍体积的 Exosome Tracker Remover，室温避光孵育10 min以中和多余探针，再用缓冲液置换试剂盒将溶液置换为 PBS，以去除游离的 Exosome Tracker，获得纯净的荧光标记外泌体。注：根据样本体积选择合适的缓冲液置换产品：S-缓冲液置换试剂盒 (货号: AC25L491) 适用于100-180 μL；M-缓冲液置换试剂盒 (货号: AC25L492) 适用于 0.2-0.5 mL；L-缓冲液置换试剂盒 (货号: AC25L493) 适用于1-2.5 mL。

3.    示踪

对于细胞实验

(1)  接种细胞：按合适的密度将细胞接种在共聚焦专用平皿中培养。

(2)  孵育外泌体：当细胞生长至70%时，加入荧光标记的外泌体，在细胞培养条件下避光孵育。注：根据细胞类型和外泌体来源确定具体孵育时间，通常为2h，可调整范围为2-4h。

(3)  清洗与染色：取出平皿，用 PBS 清洗3次，加入DAPI溶液，室温避光孵育10min，再用PBS清洗3次。若直接检测可跳过固定步骤，否则用4%多聚甲醛固定细胞。

(4)  荧光检测：在激光共聚焦显微镜下观察细胞和外泌体，拍照记录。

对于动物实验

(1)  实验动物准备：例如选择 6-8 周龄小鼠或其他适龄动物模型，每周给予两次一定剂量的外泌体。

(2)  外泌体给药：根据预设的外泌体剂量、给药方式和频次，将 Exosome Tracker 标记的外泌体注入动物体内。

(3)  检测：外泌体给药后，通常在 6-8 周后进行活体发光成像或其他荧光检测。

注意事项

1． 本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。

2． 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3． 荧光染料均存在淬灭问题，操作过程中请注意避光，以减缓荧光淬灭

4． 本品需要根据细胞类型，培养条件以及应用方向来摸索最佳的工作浓度及染色时间。

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