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动物细胞核分离试剂盒(Iodixanol梯度法)说明书详细介绍:
中文名:动物细胞核分离试剂盒(Iodixanol梯度法)
中文同义词:细胞核提取试剂盒
供应商:上海远慕
规格:50T
分类:细胞组分分离
保存:—20℃,6个月
用途:分离动物细胞核
适用范围:限于科研实验
动物细胞核分离试剂盒(Iodixanol梯度法)说明书:
细胞核提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的细胞核。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的细胞核的制备。其制备物产量高,可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶,性能稳定。
远慕生物专业供应ELISA试剂盒,细胞培养,质粒提取试剂盒,液体试剂,标准品对照品,质粒载体,动物血清,染色液,溶液,缓冲液,培养基,抗体,化学试剂,生化试剂,有机试剂,无机试剂,通用试剂,实验耗材,生物分子,微生物,蛋白质,抗生素,氨基酸,抗原,金标检测试剂盒,其他实验试剂等,提供ELISA试剂盒免费代测服务,本司的*活动正在火热开展中,欢迎订购!
动物细胞核分离试剂盒(Iodixanol梯度法)操作步骤:
1.样本处理
a.组织匀浆:称取100~200mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等,PBS或生理盐水冲洗,洗净血水,滤纸吸干,用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0mL预冷的LysisBuffer,再加入50ulLReagentA,0℃冰浴中上下研磨组织20次;有未研磨开的组织,可用双层纱布过滤。
b.培养细胞匀浆:消化细胞,PBS洗涤,800g离心5~10min收集细胞,计数。每次提取需要5×107个细胞,加入1.0mL冰预冷的LysisBuffer重悬细胞,再加入50ulReagentA,将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内,0℃冰浴研磨细胞20~30次。
2.将组织或细胞匀浆物转移到1.5ml离心管中,4℃,700g离心5min。细胞核沉淀在收集管底部,弃上清。加入0.5mL冰预冷的LysisBuffer重悬沉淀。
3.取另一新离心管内加入0.5mLMediumBuffer,吸取上一步的重悬液,沿管壁小心地加入到此离心管中,置于MediumBuffer之上,4℃,700g离心5min。细胞核沉淀在管底。
4.弃上清,在细胞核沉淀中加入0.5mLLysisBuffer重悬细胞核沉淀,1000g离心10min,弃上清,得到较纯的细胞核沉淀。
5.用50-100μLStoreBuffer或合适的反应缓冲液重悬细胞核沉淀,立即使用或-70℃保存。
动物细胞核分离试剂盒(Iodixanol梯度法)订购说明:
1.绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
2.部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。
3.部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日价格为准。
4.每日订单截止时间为18点整,部分城市可到19点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5.请办理完货款后,将底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、等形式通知我们。
动物细胞核分离试剂盒(Iodixanol梯度法)说明书注意事项:
1.为保证获得完整的细胞核,务必做到:*,全程低温操作;第二,快速;第三,在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞,这是制备细胞核的zui关键环节。与组织块相比,培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁,因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。
2.以离心力g计算正确的离心速度,不同的离心机可据此精确计算离心速度。
3.进行WesternBlot和2D-胶电泳,可直接加入上样缓冲液裂解细胞核。
4.购买后,请务必确认标签上的注意事项。
5.必须戴好防护用具,小心翼翼进行操作。
6.做好预防颠倒,摔坏的措施和管理体制。