原理：

免疫印迹（immunoblotting）又称蛋白质印迹（Western blotting），是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，可检测低至1-5ng（zui低可到10-100pg）中等大小的靶蛋白，现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。

应用：

1、目的蛋白表达定性及半定量分析

2、目的蛋白表达变化分析

3、不同样品同种蛋白表达差异分析

免疫印迹实验流程：

1、细胞及组织蛋白质抽提；

2、蛋白质定量；

3、SDS-PAGE)电泳；

4、蛋白质转印至NC或PVDF膜；

5、膜封闭及抗体孵育；

6、化学发光法检测，X胶片曝光显影；

7、数据分析；

8、提供实验报告：详细的实验方法及实验结果。

实验要求：

1. 自备一抗，一抗为进口单克隆抗体，本公司可代为购买一抗。

2. 标本尽可能新鲜；标本量：质量大于100mg；细胞数大于1×106。

标本收集

组织样品：

采集新鲜组织，离体时间尽量不超过15分钟，用锡箔纸包埋或者放入冻存管中，先放入液氮中速冻几个小时或者过夜，再放入-80度冰箱或液氮保存。

细胞样品：

低速离心收集细胞，弃去PBS，放入液氮中速冻，然后转入-80度冰箱保存。

实验结果及数据：

1、 收到标本后20-30个工作日之内提交实验结果，具体包括实验方法、步骤、所用试剂、仪器、图片及相关分析数据。

2、为了尽可能节省客户时间和标本，服务不设预实验，取标本前会与客户进行充分沟通，听取建议及提出要求，正式实验一遍后将与客户沟通是否需要再次实验，实验按结果收费。