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猪流感(H1N1)抗体ELISA试剂盒
1. 血清标本收集、处理、保存方法:
用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,全血标本室温放置1-2 h或4℃隔夜,然后4℃、3000 rpm/min离心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
2. 血浆标本收集、处理、保存方法:
根据样本要求选择EDTA或肝素na或枸缘酸钠作为抗凝剂,用含抗凝剂的采血guan或离心管采集血液标本,室温混合20 min左右,然后4℃、3000 rpm/min离心20 min,小心收集上清即为血浆。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
3. 尿液标本收集、处理、保存方法:
用干净容器收集尿液,4℃、3000 rpm/min离心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
4. 唾液标本收集、处理、保存方法:
用干净离心管收集唾液,4℃、3000 rpm/min离心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
5. 细胞标本收集、处理、保存方法:
(1)细胞培养上清
取细胞培养上清到干净离心管中,4℃、3000 rpm/min离心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
猪流感(H1N1)抗体ELISA试剂盒
(2)细胞裂解液
收集细胞培养液,4℃、3000 rpm/min离心20 min,弃去上清,用预冷的PBS(0.01M,PH 7.4)洗涤三次。加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通过反复冻融,使细胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min离心20 min,除去细胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
6. 植物标本收集、处理、保存方法:
取适量大小组织块(一般0.2-0.5 g),用预冷的PBS缓冲液(0.01M,PH 7.4)漂洗三次,滤纸拭干水分。准确称重,放入匀浆管中,加入4倍体积的匀浆介质(0.05 mol/L Tris-HCl,pH 7.4 PBS缓冲液)于匀浆管中,冰水浴条件下,剪碎组织块,手工匀浆或机器匀浆,制成匀浆液。4℃、10000 rpm/min离心20 min,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
7. 粪便标本收集、处理、保存方法:
采集时用干净的竹签挑取粪便样本到离心管中,向离心管中加入适量PBS缓冲液(0.01M,PH 7.4),搅拌均匀。然后4℃、10000 rpm/min离心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
玻璃珠法:预先将适量的玻璃珠(根据采血量多少而定)清洗后,装入采血容器中,灭菌后备用。采血过程中,边采边摇采血瓶,以使小玻璃珠在血液中滚动,以机械地除去纤维蛋白,使血液不能凝固。本法虽较麻烦,但对淋巴细胞的活性影响zui小,且可减少血小板的混杂。
(4)阿氏液采血:以阿氏液和采血量以1︰1比例采集血液,边采边轻轻摇动采血瓶,使之混匀。用阿氏液采血,除了抗凝外,多用于红细胞的保存。一般在4℃条件下,阿氏液中保存的红细胞2周其活性和特性不变。【猪口蹄抗体(区分野毒与疫苗毒)ELISA试剂盒】
玻璃珠法:预先将适量的玻璃珠(根据采血量多少而定)清洗后,装入采血容器中,灭菌后备用。采血过程中,边采边摇采血瓶,以使小玻璃珠在血液中滚动,以机械地除去纤维蛋白,使血液不能凝固。本法虽较麻烦,但对淋巴细胞的活性影响zui小,且可减少血小板的混杂。
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玻璃珠法:预先将适量的玻璃珠(根据采血量多少而定)清洗后,装入采血容器中,灭菌后备用。采血过程中,边采边摇采血瓶,以使小玻璃珠在血液中滚动,以机械地除去纤维蛋白,使血液不能凝固。本法虽较麻烦,但对淋巴细胞的活性影响zui小,且可减少血小板的混杂。
(4)阿氏液采血:以阿氏液和采血量以1︰1比例采集血液,边采边轻轻摇动采血瓶,使之混匀。用阿氏液采血,除了抗凝外,多用于红细胞的保存。一般在4℃条件下,阿氏液中保存的红细胞2周其活性和特性不变。【猪口蹄抗体(区分野毒与疫苗毒)ELISA试剂盒】
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