人真核翻译起始因子3a(eIF3a)elisa试剂盒实验方法
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人真核翻译起始因子3a(eIF3a)elisa试剂盒实验方法

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2017-03-13 08:10:49
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上海谷研实业有限公司

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产品简介

用途:本试剂盒仅供科研使用,定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本人真核翻译起始因子3a(eIF3a)elisa试剂盒实验方法的含量。

详细介绍

人真核翻译起始因子3a(eIF3a)elisa试剂盒实验方法安全性
1. 避免人体直接接触显色剂AB和终止液。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
人真核翻译起始因子3a(eIF3a)elisa试剂盒实验方法实验材料与试剂配制:
1. 仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2. 缓冲液使用:加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中,如果样品量不够或者不确定,缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。 混匀,静置1小时备用(如果标本是血清或者血浆,此步骤忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液备用。
人真核翻译起始因子3a(eIF3a)elisa试剂盒实验方法     英文名称:Human Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a ELISA Kit      检测方法:elisa酶联免疫分析法ELISA生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验方法。其试剂稳定、易保存,操作简便。凡购买本公司试剂盒非人为质量问题,收货后十五个工作日内包退换。
英文名称:Human Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a ELISA Kit  
规格:96T/48T
主要成分:酶标板,试剂,标准品等
性状:盒装液体
人白介素2受体(IL-2R)Elisa测定试剂盒用途:科研与实验试剂,不得用于临床诊断。
标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
人真核翻译起始因子3a(eIF3a)elisa试剂盒实验方法样品收集、处理及保存
1. 细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2. 细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104 -106 /ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或 者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3. 血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上 清。
5. 体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6. 组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标 本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解 冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人真核翻译起始因子3a(eIF3a)elisa试剂盒实验方法操作步骤:
1. 取出试剂盒,室温(20-25℃)放置 30 分钟。
2. 分组:取出 96 孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准 品组(个浓度)、空白孔、待测样品组。 注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
3. 加样:依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水;其余微孔中加入 50ul 的待测样本。
4. 加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液(空白对照孔除外)。
5. 温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置 15-30s,充分清洗酶标板 5 次,用吸水纸*拍干。
7. 显色:各孔加入显色剂 A  50ul 后,再加入显色剂 B  50ul
8. 终止:25-37℃下避光反应 10-15 分钟,加入 50ul 终止液。 9. 读板:在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。 
注意事项:
1. 实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。
2. 加样:加样时,要控制加样速度,避免*孔与zui后一孔间的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响 实验的准确性以及重复性。
3. 孵育:严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化,如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。
5. 建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释倍数。
6. 建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商, 如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。

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