蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

英文名称：Recombinant Aldosterone Synthase (ALDOS)

CPN2; CYP11B; CYP11BL; CYP11B2; P450C18; P450aldo; Steroid 18-hydroxylase; Aldosterone-synthesizing enzyme; Cytochrome P450 Family 11 Subfamily B Polypeptide 2

型号：GOY-01D3007

酶与激酶

代谢通路

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌

预测分子量：58.7kDa

实际分子量：59kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Gly25~Asn503 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：9.6

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

Recombinant Janus Kinase 1 (JAK1)产品名称：Janus激酶1(JAK1)重组蛋白物种：Mouse，小鼠JAK1A; JAK1B; JTK3; Tyrosine-protein kinase JAK1

Recombinant Pyridoxamine-5'-Phosphate Oxidase (PNPO)产品名称：吡哆胺-5'-磷酸氧化酶(PNPO)重组蛋白物种：Mouse，小鼠PDXPO; Pyridoxine 5'-Phosphate Oxidase

Recombinant Pyridoxal Kinase (PDXK)产品名称：吡哆醛激酶(PDXK)重组蛋白物种：Mouse，小鼠PKH; PNK; C21orf124; C21orf97; PRED79; Pyridoxine Kinase; Vitamin B6 Kinase

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

MFC-GFP(小鼠前胃细胞(绿色荧光蛋白标记))5×106cells/瓶×2gersion

氟米松三甲基乙 质量规格：美国进口 Flumethasone pivalate

 MRC-5(人胚肺成纤维细胞 )5×106cells/瓶×2

爱维莫潘 质量规格：美国进口 Alvimopan

 ARPE-19(人视网膜上细胞)5×106cells/瓶×2

茚地那韦 质量规格：美国进口 Indinavir

 HL-7702(人肝正常细胞)5×106cells/瓶×2

茚地那韦-d6 质量规格：美国进口 Indinavir-d6

 Dami(人巨核细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2

,自由 质量规格：美国进口 Tazobactam, Free acid

 小鼠肤成纤维样细胞英文名称：MouseS

羧苄青 质量规格：美国进口 Carbenicillin

 Acc-2(人涎腺腺样囊性细胞)5×106cells/瓶×2

芬达唑砜 质量规格：美国进口 Fenbendazole Sulfone

 透明质酶(含10mL酶解缓冲液)1mL

(+)-5-反式前列 质量规格：美国进口 (+)-5-trans Cloprostenol

醛固酮合酶(ALDOS)重组蛋白人10mL β- 巯基乙醇，蛋白级 β-Mercaptoethanol，Protein Grade 常温保存

鸡层连蛋白/板层素(LN)免疫试剂盒进口、组装

50T 大肠杆菌(O1)PCR检测试剂盒  低温运输，-20℃保存

牛促卵泡素(FSH)免疫试剂盒进口、组装

1000mL Tris Buffered Saline(TBS),10X),pH8.0  Tris Buffered Saline(TBS),10X),pH8.0  常温保存

人CC趋化因子受体7(CCR7)免疫试剂盒进口、组装

1瓶 Hep-2[Hep2]细胞株 Hep-2[Hep2] 低温运输和保存

250mL PBlec Washing Solution in PBS,pH7.4,2X PBlec Washing Solution in PBS,pH7.4,2X 常温保存

2 ug pLP2 pLP2 低温运输，-20℃保存

1mL LAMP可见光染料 LAMP Visible Dye -20℃保存

大鼠Ⅴ型胶原(Col Ⅴ)免疫试剂盒进口、分装