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上海市所在地
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 外周血单个核细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1167 |
商品介绍：
名称 外周血单个核细胞 2.组织来源：外周血 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 人外周血单个核细胞分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。外周血单个核细胞(PBMC)即外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。目前，主要的分离方法是密度梯度离心法，因为血液中各有形成分的比重存在差异，因此得以分离出不同的细胞。 5.方法简介： 实验室分离的人外周血单个核细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的人外周血单个核细胞经过检测，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H158 换液频率每2-3天换液一次 生长特性半贴半悬浮 细胞形态圆形 传代特性不增殖；不传代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
glypican 4 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
bFGF 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
CD309 / VEGFR2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
小鼠 TGF-beta2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
CHRFAM7A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
NAMPT 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
GOLM1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
小鼠 SCARB1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
小鼠 KDR 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
KLKB1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
外周血单个核细胞Candida antarctica酸检测试剂盒
Sporobolomyces odoratus连蛋白抗体检测试剂盒
Bensingtonia naganoensis血小板衍生生长因子β受体检测试剂盒
Pichia rhodanensis硒蛋白P检测试剂盒
Sporobolomyces inositophilus谷草转氨;天门冬转移1检测试剂盒
Candida boidinii谷草转氨;天门冬转移2检测试剂盒
Pichia sp.血小板内皮粘附分子1检测试剂盒
Pichia galeiformis肿瘤坏死因子受体超家族成员4检测试剂盒
