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上海市所在地
产品属性：
产品名称 | 规格 | 货号 |
| 外周血单核细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1231 |
商品介绍：
名称 外周血单核细胞 2.组织来源：外周血 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 人外周血单核细胞分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。单核细胞起源于骨髓中的造血干细胞，并在骨髓中发育。当它们从骨髓进入血液时仍然是尚未成熟的细胞。与其他血细胞比较，单核细胞内含有更多的非特异性脂酶，并且具有更强的吞噬作用。单核细胞在血液中停留2-3天后迁移到周围组织中，细胞体积继续增大，直径可达50-80μm，细胞内所含的溶酶体颗粒和线粒体的数目也增多，成为成熟的细胞。固定在组织中的单核细胞称为组织巨噬细胞，它们经常大量存在于淋巴结、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的单核细胞和组织巨噬细胞能生成并释放多种细胞毒、干扰素和白细胞介素，参与机体防卫机制，还产生一些能促进内皮细胞和平滑肌细胞生长的因子。在炎症周围单核细胞能进行细胞分裂，并包围异物。 5.方法简介： 实验室分离的人外周血单核细胞采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的人外周血单核细胞经CD14免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H182 换液频率每2-3天换液一次 生长特性半贴壁半悬浮 细胞形态圆形、巨噬细胞样 传代特性不增殖；不传代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 COLEC10 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 DLL1 / Delta-like 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 IL1RL1 / ST2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 ANTXR2 / CMG2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 AMICA1 / JAML 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
外周血单核细胞4号染色体开放阅读框28抗体Human SLC25A4(ADP/ATP translocase 1) ELISA Kit纤维素透析袋
阳离子通道相关蛋白2抗体Human PLEKHO1(Pleckstrin homology domain-containing family O member 1) ELISA Kit硬酯酸甲酯
阳离子通道相关蛋白3抗体Human GALC(Galactocerebrosidase) ELISA Kit趋化蛋白2（NAP-2/CXCL7）ELISA试剂盒,
液泡蛋白分选蛋白VPS13A抗体Human FAM214A(Protein FAM214A) ELISA Kit人β内啡肽（β-EP）ELISA试剂盒,β-EP ELISA kit
钙调B相关蛋白2抗体Human SERPINB13(Serpin B13) ELISA Kit人可溶性转铁蛋白受体（sTfR）ELISA试剂盒,sTfR ELISA kit
CHRAC1蛋白抗体Human PTGDR(Prostaglandin D2 receptor) ELISA Kit人腺病抗原（ADV-Ag）ELISA试剂盒,ADV-Ag ELISA
ATP依赖的解螺旋抗体Human ABCA7(ATP-binding cassette sub-family A member 7) ELISA Kit人抗呼吸道合胞病抗体（RSV）ELISA试剂盒,RSV ELISA
X染色体开放阅读框6抗体Human TCF3(Transcription factor E2-alpha) ELISA Kit人瘢痕性天疱疮抗体（CP）ELISA试剂盒,CP ELISA
