Caspase-1活性测定试剂盒

只有Caspase-1可剪切IL-1b和IL-18前体产生活性细胞因子的caspase。Caspase-11剪切45kD的caspase-1前体蛋白产生20kD和10kD片断，这两个片断可以形成异源二聚体，并进一步形成四聚体。
描述：细胞凋亡属于程序化细胞死亡，可见于各种器官和细胞，在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含10多个成员。其中只有Caspase-1是可剪切IL-1b和IL-18前体产生活性细胞因子的caspase。Caspase-11剪切45kD的caspase-1前体蛋白产生20kD和10kD片断，这两个片断可以形成异源二聚体，并进一步形成四聚体。此四聚体具有蛋白酶活性。Caspase-1通过剪切Bcl-XL调节细胞凋亡，并通过对细胞因子前体的剪切来调控相关细胞因子介导的免疫炎性反应。试剂盒测定原理基于Caspase-1特异水解其多肽底物N-acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp-pNA (Ac-YVAD-pNA)，释放出游离的硝基苯胺pNA，后者呈黄色在405 nm具有大吸收峰，用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-1的水解活性。反应体系100微升，试剂盒提供的试剂，除标准曲线外可进行50或100次样品测定。

适用：测定哺乳动物组织、细胞caspase-1活性。

组成与储存：
1. 裂解缓冲液： 20 ml ，4 ºC
2. 反应缓冲液： 10 ml ，4 ºC
3. 2 mM Ac-YVAD-pNA底物： 0.5 ml，－20 ºC避光
4. 10 mM pNA标准品： 0.5 ml，－20 ºC避光
以上标出的量为100次检测，50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存，1年内稳定。

所需仪器：
酶标仪与96孔酶标板；或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。
工作波长：大吸收波长405 nm，如不具备也可在400~450 nm范围内测定。

Caspase-1活性测定试剂盒