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WA1532 IPTG溶液 ( 50mg/ml)
产品说明:
IPTG 为安慰性诱导物,X-gal 为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG 可诱导载体Lac 操纵子DNA 区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。实现α互补的细菌铺在含有X-gal 生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA 插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。IPTG 也是常用的基因工程中重组蛋白表达的诱导剂。
此产品为IPTG 用双蒸水溶解过滤后配成的无菌溶液。
使用说明:
蛋白表达诱导:50mg/mL 浓度为210mM。如果终浓度要求为0.5mM,则每升培养基中加入2.38mL IPTG 溶液(50mg/mL)。如果实验中需要使用其他诱导浓度,可自行计算加入量。
蓝白斑筛选:
(1)在100mL 的琼脂培养基中,加入500μL 的X-gal 溶液(20mg/mL)、250μL 的IPTG 溶液(50mg/mL)和100 μL 的Amp(氨苄青霉素,100 mg/mL),制作成含X-Gal、IPTG 和Amp 平板培养基。高压灭菌后的培养基需冷却至55℃以下时加入X-Gal、IPTG 和Amp,以防失活。
(2)实际上X-gal 和IPTG 可以直接涂抹在平板培养基表面,90mm 的平板,X-gal(20mg/mL)涂40μL,IPTG(50mg/mL)涂16μL。150mm 的平板加倍使用量,待涂布的液体干后就可以使用。细菌铺板后,37℃培养过夜,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色菌落为具有DNA 插入片段的基因重组体)。
WA1532 IPTG溶液 ( 50mg/ml)
注意事项:
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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