Elabscience总铁结合力(TIBC)色法测试盒适用于检测血清样本中总铁结合力。血清内加入过量铁，使血清中运铁蛋白全部与铁结合，再加入铁吸附剂将多余的铁吸附掉，然后在酸性溶液和还原剂的作用下，使运铁蛋白中铁与蛋白分离，使血清中高铁还原成亚铁，后者与双吡啶结合成粉红色络合物，在一定范围内，铁离子多少与色泽呈正相关，测得的铁含量为TIBC，由TIBC减去血清铁值，则称为未饱和铁结合力(UIBC)。

实验关键点

① 沸水浴后离心，上清液必须澄清。

② 实验器具一定要洗干净，避免铁离子污染。

③ 粉剂比较难溶解，需提前配制。

操作步骤

标曲部分

① 标准孔：取 30 μL 不同浓度标准品，加入到对应的标准孔中。

② 向①中各孔加入 150 μL 铁显色剂。

③ 在酶标仪上振板 5 s，覆膜室温静置 5 min，酶标仪 520 nm 处，测定

各孔 OD 值。

样本部分

待测样本上清的制备:取 50μL血清，加入50μL的 10 mg/L 铁标准品应用液，涡旋混匀3s，室温静置5 min，再加入一支试剂五，涡旋混匀3 s，室温静置5 min 后，3000×g，离心10 min，取上清待测。

① 测定管：取 50μL待测样本上清到1.5 mL EP 管中。

     对照管：取 50μL双蒸水到1.5 mL EP 管中。

② 向①中各管加入250μL 铁显色剂，涡旋混匀3 s，沸水浴5 min。

③ 流水冷却，10000×g，离心10 min。(若上清浑浊，取浑浊上清于新EP管中，再离心一次)

④ 取 180μL上清到板孔中，酶标仪520 nm处，测定各孔OD值。

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