Elabscience丙二醛(MDA)比色法测试盒(测细胞)适用于检测细胞样本中的丙二醛含量。

过氧化脂质降解产物中的丙二醛(MDA)在高温及酸性环境下可与硫代ba比妥酸(TBA)反应产生红棕色产物 3,5,5’-三甲基恶唑 2,4-er酮(三甲川)，该物质在 532 nm 处有最大吸收峰。

试剂准备

① 检测前，试剂盒中的试剂平衡至室温。

② 试剂一2-8℃存放时会凝固，使用前37℃加热，直到透明液体方可使用。

③ 试剂三若有析出，需在80℃加热溶解，冷却后使用。

④ 试剂二应用液的配制：

按试剂二：双蒸水= 1.2:34的比例进行配制，2-8°C保存3个月。

⑤ 工作液的配制：

按试剂一：试剂二应用液：试剂三= 0.2:3:1的比例进行配制，现配现用。

实验关键点

① 水浴反应 40 min 时温度要控制在 95-100°C。

② 吸取上清液到酶标板时，防止产生气泡。

③ 试剂三中若有析出，需 80℃水浴加热溶解后使用。

操作步骤

① 空白管：取 0.1 mL 无水乙醇，加入到 1.5 mL EP 管中。

标准管：取 0.1 mL 10 nmol/mL 标准品，加入到对应的 1.5 mL EP 管中。

样本管：取 0.1 mL 待测样本，加入到 1.5 mL EP 管中。

② 向①中各管加入 1 mL 工作液。

③ EP 管口用保鲜膜扎紧，充分混匀，并在保鲜膜上扎一个小孔，100°C水浴 40 min。

④ 流水冷却至室温，1078×g 离心 10 min。

⑤ 用微量移液器取上清液 0.25 mL 到酶标板。(不能将沉淀加入酶标板中)。

⑥ 酶标仪上测定 532 nm 处的 OD 值。

注：如果不用保鲜膜，可先用注射器针头在 EP 管盖上扎一个小孔，防止水浴时，管盖崩开。

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