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什么是荧光原位杂交技术

时间:2024-08-18      阅读:222

  什么是荧光原位杂交技术
  你知道什么是荧光原位杂交吗?让我们一起来看看吧!
  一、FISH的定义
  荧光原位杂交技术(FISH)是一种利用荧光信号检测探针的原位杂交技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性及直观性和原位杂交的高特异性结合起来,通过荧光标记的核酸探针与待测样本核酸进行原位杂交。在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数,从而对染色体或基因异常的细胞和组织样本进行检测和诊断,为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
  二、FISH的原理
  FISH分为直接法和间接法。
  直接法是在已知碱基序列的核酸探针上标记荧光素,在组织切片、间期细胞及染色体标本上与靶核酸进行原位杂交。因所形成的杂交体带有荧光素。故可在荧光显微镜下直接观察。
  间接法使用非荧光物质标记的核酸探针。如生物素或地高x等标记探针,再通过亲和连接或免疫反应带入荧光物质来检测杂交体的存在。
  广义上讲,FISH靶序列可以是DNA或RNA,既可以用来进行基因组层面的研究,也可以进行表达层面的研究。
  目前常用的荧光素有异硫氰酸荧光素、得克萨斯红、罗丹明及其衍生物四甲基异硫氰酸罗丹明等。
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