凯杰qiagen质粒提取试剂盒实验原理
时间:2024-08-28 阅读:341
一、凯杰Qiagen介绍
QIAGEN是一家专业化致力于生物分子样品制备解决方案的跨国经营企业,总部位于德国。1984年,QIAGEN在德国成立,1996年在美国纽约纳斯达克上市。QIAGEN拥有超过1000项zhuanli和认可证明,在18个国家设立了分公司,代理商服务国超过40个,在全球有超过400000的用户。QIAGEN提供的产品超过500类,包括各种试剂,耗材和自动化纯化工作站。这些产品用于样品采集,稳定,核酸或蛋白的分离,纯化和检测中,不仅广泛的应用于科研领域的各个方面,在生物技术,制药,法医研究,食品安全检测,畜牧业和分子诊断领域也得到了广泛的应用。QIAGEN产品的zuo越品质和在应用中的出色表现使得其成为样品处理中标准的代名词。
二、凯杰qiagen质粒提取试剂盒实验原理
Qiagen质粒提取试剂盒的实验原理主要基于细菌的培养、收获和裂解,以及随后通过特定的缓冲液和操作步骤来纯化质粒DNA。这个过程涉及几个关键步骤,包括细菌的培养、收获、裂解,以及质粒DNA的纯化。
1. 细菌的培养:首先,从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到含有适当抗生素的LB液体培养基中,并在特定条件下培养,以便质粒DNA能够自主复制。
2. 细菌的收获和裂解:通过离心收集细菌,然后使用特定的缓冲液(如Buffer P1)重悬细菌。接着添加Buffer P2并剧烈晃动以裂解细菌,这一步中SDS(十二烷基硫酸钠)起到变性蛋白质的作用,促进细胞壁的裂解。随后加入冰浴的Buffer P3,通过离心和过滤步骤去除细胞碎片和未裂解的细胞。
3. 质粒DNA的纯化:经过上述步骤后,质粒DNA被释放到溶液中。通过使用QIAGEN-tip柱进行进一步的纯化,利用特定的缓冲液(如Buffer QBT、Buffer QC和Buffer QN)进行洗涤和洗脱,最终得到较为纯净的质粒DNA。
这个过程的关键在于使用特定的缓冲液和操作步骤来最大限度地提取质粒DNA,同时去除杂质,如蛋白质和基因组DNA,以确保获得高质量的质粒产品。此外,通过加入异丙醇和乙醇进行沉淀和清洗,进一步提高了质粒DNA的纯度和浓度。
三、凯杰qiagen质粒提取试剂盒目录表
货号 | 产品名称 | 规格 |
12362 | EndoFree Plasmid Maxi Kit (10) | 10T |
12381 | EndoFree Plasmid Mega Kit (5) | 5T |
12391 | EndoFree Plasmid Giga Kit (5) | 5T |