1. 患者分组：

T1D组：纳入100例瑞典T1D的患者，其中，93例患者在确诊当天进行了血样采集，3例患者在诊断后一天内进行了采样，4例患者的T1D病程时间未知。在该研究组中，50例患者为15岁以下儿童(中位年龄8.8岁;范围2.3 - 14.7;男/女: 27/23=1.17)，50例为青少年和成人(中位年龄16.5岁;范围15.1 -41;男/女: 32/18 = 1.78)。

健康对照组：纳入200名健康对照，包括100名儿童和100名成人。对照组儿童的中位年龄为12.6岁，范围为11.9-13.6，男/女: 50/50=1.00；成人中位年龄42.5岁，范围21 - 65，男/女：59/41=1.44。

2. 检测方法

RBAs、ICA-IF和ELISA的结果汇总见表1和表2。3 Screen的灵敏度为93%，特异度为97.5%；2 Screen的灵敏度为91%，特异度为98.5%。93例初筛阳性患者中，多数为多种自身抗体阳性，其中72%(67/93)同时为GADA和IA-2A阳性，57%(53/93)为三种自身抗体(GADA、IA-2A和ZnT8A)阳性。在T1D筛查阴性的7例中，仅有1例呈GADA ELISA单项检测阳性。

在健康对照中，仅有1例(0.5%)存在多种自身抗体(IA-2A和ZnT8A)阳性。

在13例T1D患者和2名健康对照中IAA呈阳性。

表1 100例1型糖尿病患者的胰岛β细胞特异性自身抗体结果

IA-2A RBA的灵敏度为78%。GADA RBA的加入提高了12%灵敏度，将该方法学整体灵敏度提高至90%，而ZnT8A RBA (R/W/Q中的任何一种)的加入使灵敏度进一步提高到 91%。相比之下，添加IAA和ICA-IF结果并没有比使用其他检测方法获得更高的灵敏度(表1)。

2 Screen和3 Screen两种检测方法最一致(Kappa=0.97)。IA-2A RBA和IA-2A ELISA两种检测方法的一致性最好(Kappa=0.96)。

研究者采用了6种RBA、1种IF和5种ELISA对100名T1D患者和200名健康对照的胰岛β细胞特异性自身抗体进行了检测，结果发现3 Screen方法表现优异，其灵敏度(93%)和特异性(97.5%)最高。2 Screen和3 Screen的检测灵敏度优于任何RBA。

相比于放免法，GADA ELISA拥有更高的检出率(84% vs 77% GADA RBA)，大多数(76%)患者在两种GADA检测方法中均呈阳性，而8例患者仅通过ELISA检测为GADA阳性，1例仅通过GADA RBA检测为GADA阳性。

相比于放免法(61%)，ZnT8A ELISA (ZnT8R和ZnT8W变体)可在更多(75%)T1D患者中检测出阳性。IA-2A ELISA和RBA鉴定出相同数量(78%)的阳性患者。

3 Screen适用于人群筛查。除免疫项目常用的血清样本外，经Ca2+处理的EDTA血浆也可以得到可靠的结果[24,25]。在样品中加入血红蛋白、生物素、脂肪乳剂或胆红素对结果没有显著影响，这表明该检测不容易受到这些物质的干扰。

综上所述，本研究显示了3 Screen优异的性能，具有较高的检测灵敏度和特异性，可用于健康人群中对三种自身抗体（GADA、IA-2A和ZnT8A）的初步筛查。在3 Screen筛查阳性的情况下，需进一步对抗体进行单项检测，以识别具有进展为T1D高风险的多重自身抗体阳性患者。经3 Screen筛查试验阴性的样本通常不需要进一步检测。此外，对两岁以下儿童进行IAA检测也是有必要的。因此，3 Screen + IAA的测试策略更适合非常年幼的儿童。