ZCIBIO/茁彩生物 品牌
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上海市所在地
外包服务 ATP染色
一、染色步骤
1、工作液配制:Tris碱5g+氯化钙0.499g+蒸馏水定容至250ml,室温保存。‚取染液中合
适的量,用盐酸调PH至10.4。ƒ取染液中合适的量,每10ml的量加15mg的ATP钠盐,充
分溶解,调PH至9.4。
2、工作液孵育:未经固定的新鲜组织冰冻切片自然晾干,PH10.4的工作液孵育5min,倾去孵育液,PH9.4的工作液孵育30min。
3、CaCL2染色:倾去孵育液,CaCL2溶液处理3次,每次2min。
4、硝酸钴染色:硝酸钴作用5min,流水冲洗5min。
5、硫化铵染色:1%硫化铵溶液处理30s,流水冲洗5min。
6、脱水封片:切片依次入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。
7、显微镜镜检,图像采集分析。
二、结果判读:
Ⅰ型呈浅灰色或无色,Ⅱ型呈深灰或黑色,分型清楚。
三、注意事项:
1、切片一定要是新鲜组织的冰冻切片,不可以固定。
2、Tris碱、氯化钙粉剂常温保存,硫化铵常温避光保存,ATP钠盐-20℃保存,其它染液4℃
保存,使用前先复常温。
3、工作液和1%硫化铵溶液要现配现用,不能保存。
外包服务 ATP染色
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