一、间.苯二酚碱性品红染色实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。

2、氧化：酸化高.锰酸钾(高.锰酸钾：硫酸=1:1混合)氧化5min，自来水洗。

3、漂白：草酸溶液漂白1-2min，至无色，流水冲洗2min，95%的乙醇稍浸洗。

4、间.苯二酚碱性品红染色：切片入间苯.二酚品红染液中浸染并加盖，室温下3～4h，流水

冲洗。

5、背景分化：盐酸酒精分化至无染液脱下，弹力纤维清晰的紫红色，背景淡紫或近乎无色。

6、复染VG：将饱和与酸性品红9：1混合成VG染液，染1-3min，快速水洗，无水

乙醇三缸快速脱水。

7、透明封片：干净的二甲苯透明1-5min，中性树胶封片。

8、显微镜镜检，图像采集分析。

二、染色判读：

弹力纤维紫红色，胶原纤维红色，背景其他成分黄色。

三、注意事项：

1、VG复染过程中水洗要快，防止红色褪掉，无水乙醇也要快洗，防止黄色变暗。

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