高转移人肝癌细胞；LM3
高转移人肝癌细胞；LM3
| 别称 | LM3; MHCC-LM3; MHCCLM3 |
| 背景描述 | HCCLM3细胞是一株由人肝癌细胞株MHCC97-H接种裸鼠、进行3次肺转移筛选、取肺转移瘤建成皮下接种后高度自发性肺转移的肝癌细胞系。HCCLM3细胞被广泛用于人肝癌发病机理的基础和临床研究，也可用于抗肿瘤药物筛选。 |
| 种属 | 人 |
| 年龄（性别） | 39岁 |
| 组织来源 | 肝；肝癌 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 肿瘤类型 | 肝胆癌细胞 |
| 生长培养基 | DMEM＋10% FBS＋1% P/S |
| 推荐传代比例 | 1:2-1:4 |
| 推荐换液频率 | 2~3次/周 |
| 倍增时间 | ~35-48 hours |
| 冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃ |
细胞特性：
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定：细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
注意事项：
（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；
（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。
（3）消化和吹打，切忌yi酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入wan全培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。
（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。
（5）关于“慢冻”，传统的方法，LLC细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
