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液相色谱与质谱联用是大规模蛋白质鉴定的一种重要方法,在鉴定之前,需要对样品进行一系列前处理。其中,蛋白质的酶切耗时最多,往往需要过夜水浴保温处理,这大大限制了大规模蛋白质鉴定的速度,成了蛋白质组学研究的瓶颈。
蛋白质的二级结构主要由α-螺旋和β-折叠构成,由于疏水和亲水基团的作用,在α-螺旋中,氨基酸形成紧密的堆积结构,使酶不容易接触到内部的特异酶切位点,降低了酶切效率。经研究发现,蛋白质在微波的作用下,三维结构会被不同程度的破坏,从而对蛋白质起到解旋的作用,增加酶和酶切位点的接触机会,大大提高胶内酶切和溶液内酶切的效率。
在对抗体进行分析(如测定分子量)前经常需要对抗体进行去糖基化。使用微波辅助酶切技术,同样可以大大提高酶切效率。
HST公司开发的快速微波辅助酶切系统为蛋白质酶切提供了一个方便、高效、安全的解决方案。系统产生的高频微波一方面对反应样品和腔内水进行快速均匀的加热,结合气泡散热效应,对腔内水进行强制循环并维持水温误差在±0.5℃内;一方面促进蛋白质解旋,增加酶和酶切位点的接触机会,提高蛋白质酶切的效率。样品架可同时容纳样品数量达96个,满足高通量样品处理的需要。
技术参数:
● 快速酶切时间:5—10分钟
● 高通量样品处理能力:一次处理多至96个样品
● 3—5分钟即可达到预设酶解温度
● 温度控制准确性:±0.5℃
● 使用方便:顶开盖设计,操作简单方便
● 高度的安全性:全封闭内腔,避免微波对外界的辐射
● 功率范围:50—950W可调
● 样品容器类型:离心管、96孔板或1升样品瓶
● 使用微波加热,结合气泡效应对水进行冷却和循环,确保样品腔不同位置温度均一,处理的结果的高度重现性