走进仪器 | 紫外可见分光光度计UV3100

紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理，利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。

1852年

比尔(Beer)参考了布给尔(Bouguer)在1729年和朗伯(Lambert)在1760年所发表的文章，提出了分光光度的基本定律，即液层厚度相等时，颜色的强度与呈色溶液的浓度成比例，从而奠定了分光光度法的理论基础，这就是著名的朗伯比尔定律。

1854年

杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人将朗伯比尔定律应用于定量分析化学领域，并且设计了第一台比色计。

1918年

美国国家标准局制成了第一台紫外可见分光光度计。此后，紫外可见分光光度计经不断改进，又出现自动记录、自动打印、数字显示等各种类型的仪器，使分光光度法的灵敏度和准确度也不断提高，应用范围不断扩大。

紫外可见分光光度计主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。

（1）光源：提供符合要求的入射光；

（2）单色器：将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束；

（3）吸收池：又叫比色皿，用于盛放待测溶液和决定透光液层厚度的器件；

（4）检测器：将透过吸收池的光信号变成可测的电信号；

（5）信号显示系统：数字显示和自动记录型装置。

（1）细菌培养：OD测量通常使用600nm的波长快速进行测试，以估计细胞浓度并跟踪生长。

（2）药物分析：最常见的用途之一是在制药行业。如：Kuljan in 等人通过将阿-仑 -膦- 酸- 钠与Fe3+络合，用紫外分光光度法测定了 阿-仑- 膦 -酸- 钠 的含量。

（3）水质分析：如《GB/T 5750.6-2006 生活饮用水标准检验方法 金属指标》水中铝离子与水杨基荧光酮及阳离子表面活性剂氯代十六烷基呲淀在 pH 5.2~6.8 范围内形成玫瑰红色三元络合物，可比色定量。

（4）其他应用：环境监测、教学研究、计量校准、石油化工等。

（1）波长准确度的重要性

波长准确度是指波长的实际测定值与理论值(真值)的差，其波长准确度是很重要的技术指标。若要比对两台紫外可见分光光度计对同一样品的分析测试结果，如果仪器的波长准确度不好，就无法进行比较，或比较不出正确的结果。同一物质进行测试时，由于不同波长时摩尔吸光系数不同，就会有不同的灵敏度，即使是同一样品，测试的数据也会不相同。如果使用者要用一台紫外可见分光光度计做定量分析，若仪器的波长准确度不好，也会因仪器的波长误差而产生很大的分析误差。

（2）稳定性的重要性

其稳定性应包括基线漂移和光度重复性两个方面。使用时有一个很重要的原则或宗旨就是仪器要稳定可靠。如果一台仪器的稳定性差，就不可能得到满意的分析测试结果。仪器的稳定性是制造、挑选或使用紫外可见分光光度计的关键问题之一。

有些使用者把基线漂移作为稳定性，实际上基线漂移只是稳定性的内容之一。如果一台紫外可见分光光度计的基线漂移符合使用要求，但其光度重复性很差，它仍然不能满足使用者的使用要求；反之，如果一台紫外可见分光光度计的光度重复性符合使用要求，但其基线漂移大，它也不能满足使用要求。只有基线漂移很小、重复性也很好的仪器才能满足使用要求，才是好仪器。

（3）基线平直度的重要性

基线平直度是指每个波长上的光度噪声，它是用户最关心的技术指标之一，也是仪器各个波长上主要分析误差的来源之一，它决定仪器在各个波长下的分析检测浓度的下限(或决定各个波长下仪器的灵敏度)。

（4）线性动态范围的重要性

线性动态范围是影响分析测试误差的技术指标。如果仪器的线性动态范围很宽，则无论是对很稀的样品还是对很浓的样品进行分析时，其分析测试的结果都在所要求的误差范围内。所以应选择线性动态范围大的紫外可见分光光度计。

其线性动态范围取决于仪器的杂散光和噪声，它们是分测试误差的主要来源。杂散光限制被分析测试样品浓度的上限，噪声限制被分析样品浓度的下限。其线性动态范围非常重要，它限制仪器的使用范围(即限制仪器的适用性)。

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