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高效微流电动液相色谱系统-万古霉素固定相分离检测手性药物

时间:2020-01-16      阅读:996

1. 背景介绍

毛细管电色谱(CEC)结合了毛细管电泳(CE)和高效液相色谱(HPLC)的较佳特点:CE 的分离效率高,高效液相色谱的多选择性和大样本容量。近年来,对映体的分离受到了广泛关注,许多 HPLC 中常见的手性固定相被用在CEC 中,例如环糊精、纤维素、大环内酯类抗生素、阴离子交换型固定相和分子印迹聚合物等。然而,当在没有压力的情况下使用 CEC 时,特别是对于填充柱,仍然存在与气泡形成和柱干涸相关的问题和困难,在开管和整体柱中不会出现这个问题。熔融玻璃管壁似乎是形成气泡的重要因素。对于填充柱中出现的气泡和柱干涸的问题,可以通过高效微流电动液相色谱(eHPLC)系统解决, 其流动相由压力流和电渗流(EOF)共同驱动。

在 eHPLC 系统中,可以在毛细管色谱柱的出口端和进口端施加一个大于 1000 psi 的压力,这样就可以避免在使用 CEC 模式时出现气泡和柱干涸等问题。同时,eHPLC 系统中样品可通过旋转式注射器实现定量引入。另外,EOF  可以与整个流动相的方向相同或相反,因此可以影响样品洗脱顺序。更重要的是 EOF 适用于梯度洗脱模式。因此,通过eHPLC 系统,CEC 的优势可以充分的实现。

我们选取一种大环内酯类抗生素-万古霉素作为手性固定相,建立了 eHPLC 系统分离检测手性药物的方法。

2. 测试条件

仪器:

TriSep ®-3000 高效微流电动液相色谱系统

3. 测试结果

图 1 高效微流电动液相色谱法(实线)和毛细管液相色谱法(虚线)检测手性药物色谱图

注: a 异丙嗪;b 卡替洛尔; c 塞利洛尔;d 沙丁胺醇

4. 结论

采用 TriSep ®-3000 高效微流电动液相色谱系统,并在有机相中加入万古霉素做手性固定相,可实现异丙嗪、 卡替洛尔、塞利洛尔和沙丁胺醇的分离检测。并且得到,在相同的条件下,高效微流电动液相色谱法的效率和分辨率高于毛细管液相色谱法。

5. 配置列表

 

仪器配置

TriSep ®-3000 高效微流电动液相色谱系统(配二元梯度泵、柱温箱、UV 检测器、高压电源、自动进样器、微流控、控制器)

Clarity Lite 色谱工作站

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