进口正相液相色谱柱的清洗和保存方法
时间:2020-03-12 阅读:9961
正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。
正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱,其柱填料是吸附剂,其表面上分布有活性吸附位点,溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小,溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附,从而造成了在柱内保留时间的差异,使不同物质得到分离。
进口正相液相色谱柱的主要特征:
正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱,其柱填料是吸附剂,其表面上分布有活性吸附位点,溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小,溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附,从而造成了在柱内保留时间的差异,使不同物质得到分离。
进口正相液相色谱柱保存方法:
1.正相条件使用直接保存在正相流动相中;2.反相条件使用保存在甲醇或乙腈中注意:氰基柱与氨基柱在正反相交替使用时,注意用无水乙醇或异丙醇进行过渡,根据柱压控制适当的流速。反相氰基柱保存在有机溶剂的水溶液中(如55%乙腈水溶液),反相氨基柱保存在纯有机溶剂中(如乙腈)。
正相色谱柱清洗方法:
1.正相条件清洗方法,依次用异丙醇(注意流速)→甲醇→异丙醇→正相流动中进行使用。2.反相条件清洗方法,按以下方法进行清洗:以乙腈:水(1:9,v/v)→乙腈→乙腈:水(1:9,v/v)依次冲洗,然后进行使用。
正相色谱柱再生方法:
以甲醇:氯仿(50:50,v/v)→乙酸乙酯,分别用10~20倍柱体积反冲色谱柱,然后再按正方向用流动相平衡。