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关于操作康宁基质胶的温馨提示

时间:2022-06-21      阅读:5232

   康宁基质胶为一种从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出的基底膜基质,主要成分包含层粘连蛋白、IV型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。鉴于基质胶的操作环境要求比较严格,为保证您的实验顺利,特此对以下几个方面进行温馨提示:
  1.收货时,首先确认还有干冰,基质胶成固态,液面水平,如有异常请及时拍照取证并联系我们;
  2.整个基质胶只能分装一次,在分装前,要先放在4℃冰箱(最好先把基质胶插在冰上,然后放入4℃冰箱)一段时间待之融化(切记不要放在冰箱门上或者是经常要敞开口取放试剂的冰箱),且分装用的枪头、EP管等都要提前-20℃预冷(因为基质胶在10℃以上即会发生成胶凝固导致基质胶报废),整个分装过程要在冰上进行,且以后每次实验时拿出本次用量的已经分装好的基质胶用,该次实验用不完的基质胶要扔掉,不可以留作下次使用;
  3.实验人员的手心不要接触基质胶,如:要手持装有基质胶的EP管的上方,防止体温使基质胶成胶凝固;
  4.平常基质胶的浓度是8-12mg/ml,高浓度的基质胶的浓度是18-22mg/ml,具体浓度可通过货号查询;
  5.以24孔板为例,做肿瘤细胞侵袭实验时每孔加入基质胶20-30ug(一般配成200-300ug/ml的工作浓度,然后每孔加入100ul即可)。此时,基质胶是100ul即可)。此时,基质胶是稀释到很低的倍数(有的实验需要低至30倍稀释,具体最适浓度需根据自己的实验进行优化)。铺胶后置于37℃提升箱放置1小时,取出后如果上层有液态提升基,需小心弃去上层的液态提升基即可使用(此时基质胶沉在底部形成一小薄层)。
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