关于胎牛血清的知识
时间:2022-11-21 阅读:982
什么是胎牛血清?
胎牛血清是通过母牛剖腹产胎牛心脏密闭穿刺采血获得的新鲜胎牛全血,经自然层析、离心后收集得到去除血细胞、纤维蛋白等成分的淡黄色透明上清液体,后经生产使用多级高置流膜过滤技术和三级0.1µm终端微滤方法处理后,常用于细胞培养相关实验。
胎牛血清的重要性
细胞培养是很多下游实验的基础,细胞培养的好坏会直接影响后续实验的成功和稳定,而胎牛血清作为细胞培养的主要试剂对实验的重要性不言而喻!
胎牛血清是细胞培养中常用的天然培养基,因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低,且含有丰富的细胞生长必须的营养成份,故目前多数实验人员选择的都是胎牛血清进行动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
✔ 提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
✔ 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
✔ 有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
✔ 是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
✔ 起酸碱度缓冲液作用。
✔ 提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
胎牛血清与其它牛血清有何区别?
根据牛出生时间和血清采集分离方法分为:
✔ 胎牛血清(Foetal Bovine Serum,简称FBS):胎牛血清是指怀孕3-8个月的母牛被屠宰后,发育未wanquan的胎牛心脏密闭穿刺采血后,通过一系列工艺处理最终获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子,一旦胚胎发育wanquan这些因子会自动消失。
✔ 新生牛血清(Newborn Calf Serum,简称NBCS):出生14小时内未进食的新生牛,通常采用颈动脉采集血液分离得到的血清。
✔ 小牛血清(Calf Serum):出生后3天至6月龄小牛动脉采血分离血清。
✔ 成年牛血清(Adult Bovine Serum,简称ABS)指的是屠宰时收集全血后分离得到血清。
胎牛血清要求:
1、性状、外观:浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
2、蛋白质含量:3.5%~5.0%( w/v)
3、血红蛋白含量:≤ 0.02%( w/v)
4、无菌检验:阴性
5、支原体检验:阴性
6、细菌内毒素:≤5(EU/ml)
7、牛腹泻病毒:阴性
8、大肠杆菌噬菌体:阴性
9、支持细胞增殖:(Sp2/0-Ag14) 生长曲线 (接种浓度)最大增殖浓度 ≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间:≤15h,克隆率:≥85%