天然AAV1-AAV9、AAVrh10、AAVDJ衣壳（1E+09-1E+10衣壳）和变性AAV5衣壳（1E+09-1E+10衣帽，在样品缓冲液中于95°C变性10分钟）的斑点印迹分析。

在室温下，用PBST（PBS+0.1%吐温20）中的5%干乳将硝化纤维膜封闭1小时。将抗AAV5（完整颗粒）小鼠单克隆抗体ADK5a在封闭缓冲液（抗体浓度100 ng/ml）中稀释，并在室温下孵育1小时。第二抗体山羊抗小鼠IgG-HRP也在封闭缓冲区（抗体浓度200 ng/ml）中溶解，并在RT下孵育一小时。使用PierceTM ECL Western Blotting Substrate通过化学发光检测可见条带。

用于表征感染的不同阶段，对AAV5组装过程的分析非常有用。ADK5a与完整的腺相关病毒5颗粒、空衣壳和完整衣壳特异性反应。识别组装衣壳的构象表位，不存在于变性衣壳蛋白和天然但未组装的衣壳蛋白中。该抗体不能用于免疫印迹。该抗体可用于中和实验。

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抗AAV-5、ADK 5a、小鼠单克隆抗体：

数量10 微克

抗体类型 单克隆

宿主 小鼠

亚型 IgG2a kappa

偶联物 未偶联

应用 亲和色谱、斑点印迹、ELISA、ICC/IF、IP、中和试验

纯化 亲和色谱

反应性 AAV5

无反应性 AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV11, AAV12, AAVDJ, AAVrh10, AAVrh74

重悬前储存 直至标示的有效期前，储存于2-8°C

重悬后储存 可在2-8°C下储存长达3个月；长期储存需分装于-20°C；避免冻融循环

用途 仅供研究使用

克隆号 ADK5a

免疫原 AAV5衣壳

浓度 用200微升PBS重悬后浓度为50微克/毫升

配方 冻干；用200微升无菌PBS重悬

结合亲和力

KD值（AAV5）= 4.9E-11 M

同义词腺相关病毒5，AAV-5

同种型：IgG2aκ

测试应用测试稀释度

免疫细胞化学（ICC）/ 免疫荧光（IF） 1:20

亲和色谱 依据检测而定

斑点印迹 1:500 (0.1 微克/毫升；非变性条件)

酶联免疫吸附试验（ELISA） 依据检测而定

免疫沉淀（IP） 1:5

中和试验EC50 ~7 微克/毫升（AAV5） - 依据检测而定

抗AAV-5、ADK 5a、小鼠单克隆抗体特点：

纯化、冻干

小鼠单克隆抗体

适用于斑点印迹、ELISA和中和测定

与AAV5完整衣壳反应

文献参考：

Ohba K. et al. Adeno-associated virus vector system controlling capsid expression improves viral quantity and quality., iScience, 26, 106487, (2023).

Emmanuel, S. N., Mietzsch, M., Tseng, Y. S., Smith, J. K. & Agbandje-Mckenna, M. Parvovirus Capsid-Antibody Complex Structures Reveal Conservation of Antigenic Epitopes across the Family. Viral Immunol. 34, 3–17 (2021).

Baatartsogt, N. et al. A sensitive and reproducible cell-based assay via secNanoLuc to detect neutralizing antibody against adeno-associated virus vector capsid. Mol. Ther. - Methods Clin. Dev. 22, 162–171 (2021).

Silveria, M. A., Large, E. E., Zane, G. M., White, T. A. & Chapman, M. S. The structure of an aav5-aavr complex at 2.5 ? resolution: Implications for cellular entry and immune neutralization of aav gene therapy vectors. Viruses 12, (2020).

PROGEN公司成立于1983年，总部位于德国海德堡，由海德堡大学教授联合创办，体外诊断试剂的制造商和供应商，也是德国癌症研究中心的合作伙伴。 主要产品线： 经过质检验证的抗体、体外诊断产品、抗体噬菌体展示技术、密度梯度分离液和AAV(腺相关病毒）检测试剂盒等。

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