异尖线虫属PCR检测试剂盒
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异尖线虫属PCR检测试剂盒

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2023-03-14 12:02:04
148
属性:
供货周期:现货;规格:50T;应用领域:化工;主要用途:用于科研;英文名称: Anisakis spp.PCR;储存条件-:20℃避光保存,避免反复冻融;分类 : PCR检测试剂盒;
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产品属性
供货周期
现货
规格
50T
应用领域
化工
主要用途
用于科研
英文名称
Anisakis spp.PCR
储存条件-
20℃避光保存,避免反复冻融
分类
PCR检测试剂盒
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上海研生实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

PCR实验方法步骤:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
产品属性:
产品名称:异尖线虫属PCR检测试剂盒
英文名称:Anisakis spp.PCR
规格:50T
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20
避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。

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实验过程:

一、试剂准备

二、操作步骤

1. DNA模板
  2
.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
  3
10×PCR Buffer
  4
2mM dNTPmix:含dATPdCTPdGTPdTTP2mM
  5
Taq

1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
  10×PCR buffer             5μl
  dNTP mixl                 4μl
 
引物110pM               2μl
 
引物210PM              2μl
  Taq
酶(2U/μl              1μl
        DNA
模板(50ng-1μg/μl
   1   μl
 
ddH2O                 50 μl
 
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
 
 

2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循环30-35次,zui后在72 保温7min
3
.结束反应,PCR产物放置于4
待电泳检测或-20保存。
4
PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

注意事项:
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物AB液时,避免使用带金属部分的加样器 。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

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储存条件:
仅用于科研14或-20样品收集、处理及保存方法
1.
血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.
血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3.
细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4.
组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5.
保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20
,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


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