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PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
产品属性:
产品名称:呼吸道合胞病毒PCR检测试剂盒
英文名称:Respiratory Syncytial Virus(RSV)RTPCR
规格:50T
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
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实验过程:
一、试剂准备 | 二、操作步骤 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 |
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
Syntaxin 6: 突触融合蛋白6抗体 0.2ml
phospho-ERF (Thr526): 0酸化转录因子ERF抗体 0.1ml
小鼠抗3-0酸甘油醛脱氢酶单克隆抗体(内参抗体) Anti-GAPDH 0.1ml
Anti-VSV-G tag/FITC 荧光素标记VSV-G tag标签抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Gab1 (Tyr627) 0酸化接头蛋白Gab 1抗体 规格 0.1ml
CK1/8/19 (Cytokeratin1/8/19; Keratin 1/8/19)peptide 细胞角蛋白1/8/19抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
小鼠Ⅷ(FⅧ)ELISA试剂盒 ,英文名: FⅧ ELISA Kit
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CY3蛋白标记试剂盒3次(200微克/次)
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呼吸道合胞病毒PCR检测试剂盒EGFP protein/rEGFP/Recombinant EGFP(Enhanced Green Fluorecent protein) 重组增强型绿色荧光蛋白Multi-class antibodies规格: 100ug
Anti-CD141/THBD 凝血调节蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PARP (N-Terminus) 多腺苷二0酸多聚酶抗体(N端) 规格 0.1ml
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Thrombopoietin 英文名称: 血小板生成素/巨核细胞集落刺激因子抗体 0.1ml
ChRM2 英文名称: 毒蕈碱型乙酰受体抗体 0.1ml
Anti-CD141/THBD 凝血调节蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。