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菌种的培养:
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在上延续使用半年左右。
6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
公司专业代理ATCC菌种,*,质量保证,为大中型科研提供严格质量体系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ标准菌株。
产品名称 | 用途 | 货号 |
仅供科研使用 | YS-01J0217 |
培养条件:
1、营养肉汁琼脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
2、需氧类型:好氧
3、培养温度:55℃
保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围*的微生物保存法。
注意事项:
1、菌种常规培养时间:细菌1-2天,酵母3天,霉菌5-7天,大型真菌7-10天。
2、试管斜面种请尽快转接,不建议长期存放。
3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,BNCC不负责任。
4、使用者应保证菌种的安全储存和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。
罗汉果黄素 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;10mg 化核纤层蛋白A/C抗体 FBXO32 ELISA Kit F-框蛋白32(FBXO32)ELISA试剂盒
规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 人周期素依赖性激2C(CDKN2C)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠催产素(OT)ELISA试剂盒,英文名:OT ELISA Kit
盐柔红(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Daunorubicin HCl 足突蛋白(PDCN)重组蛋白英文名称:Recombinant Podocin (PDCN)
鹰嘴豆芽素A;Biochanin A 规格: 20mg 订购|咨询 A875(人黑色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2
铁蛋白(Fer) 订购|咨询 规格: 3支/套,0.5ml/支 免疫相关鸟苷三基因抗体 IL20 ELISA Kit 白介素20(IL20)ELISA试剂盒
4-羟基氨蝶 质量规格:美国进口 4-Hydroxy Triamterene SW 982(人滑膜肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2
桃叶珊瑚苷 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 ELISA Kit for Human Hyaluronidase-1小鼠二乳清脱(DHODH)ELISA试剂盒,英文名:DHODH ELISA Kit
α-亚麻 英文名称:Alpha linolenic acid 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 20mg/支 泛素特异性9X抗体
异紫堇定碱 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;20mg 短链L-3羟基A脱抗体 DOLK ELISA Kit 鲱精胺激(DOLK)ELISA试剂盒
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风信子素 订购|咨询 规格: 20mg 化组蛋白去酰化6抗体 CDH17 ELISA Kit 肝肠钙黏蛋白(CDH17)ELISA试剂盒
肌钠 订购|咨询 规格: 100mg 自噬微管相关蛋白轻链3抗体 CPNE9 ELISA Kit CopineⅨ蛋白(CPNE9)ELISA试剂盒
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