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试剂组成和配制:
试剂一:液体×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体×1瓶,4℃避光保存。
试剂四:液体×1瓶,4℃避光保存,未变成蓝绿色之前均可使用。
标准品:液体×1支(EP管中),2 μmol/mL酚标准液,4℃保存。
商品属性:
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
50管/48样 | 紫外分光光度法 | YS-01S6367 |
商品介绍:
公司产品仅用于科研测定意义
ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
测定原理:
NAD-ME催化NAD+还原成NADH,在340nm下测定NADH增加速率。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿和蒸馏水。
粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,4℃、8000g离心10min,取上清液待测。
2. 细菌或细胞:按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
3. 血液可直接测定,或者适当稀释后测定。
测定步骤:
1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到510 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。
3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸馏水,40μL试剂二,40μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;加入试剂四120μL,混匀后于510nm测定吸光度,记为A空白管。
4. 标准管:取EP管,加入4μL标准品,40μL试剂二,40μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;加入试剂四120μL,混匀后于510nm测定吸光度,记为A标准管。
5. 对照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸馏水,40μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;加入试剂四120μL,混匀后于510nm测定吸光度,记为A测定管。
6. 测定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL试剂二,40μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;加入试剂四120μL,混匀后于510nm测定吸光度,记为A测定管。
其中标准管和空白管只需做一管,测定管和对照管每个样均需做。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
人尾型同源盒转录因子(CDX2)酶联吸附测定试剂盒芽孢杆MEK1 (D2R1O) Rabbit mAb
人窖蛋白(Cav-1)酶联吸附测定试剂盒 大肠杆SirT2 (D4S6J) Rabbit mAb
人CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)酶联吸附测定试剂盒 卡尔斯巴德唯盐RAD21 (D5Y8S) Rabbit mAb
人CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)酶联吸附测定试剂盒单孢共头霉Initiator Caspases Antibody Sampler Kit
人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)酶联吸附测定试剂盒 奇异球Phospho-EphA2 (Tyr588) (D7X2L) Rabbit mAb
人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)酶联吸附测定试剂盒 黑曲霉SignalSilence® γ-Catenin siRNA II (Mouse Specific)
人CCAAT增强子结合蛋白γ(C/EBPγ)酶联吸附测定试剂盒 红菇属MDR1/ABCB1 (D3H1Q) Rabbit mAb
人CC趋化因子受体1(CCR1)酶联吸附测定试剂盒 泡盛曲霉AFAP1L2/XB130 (D1B5) Rabbit mAb
人补体调节蛋白(CCP)酶联吸附测定试剂盒 多主葡萄壳Phospho-MCM3 (Ser112) (D3S4M) Rabbit mAb
人保护素(CD59)酶联吸附测定试剂盒梭VEGF Receptor 2 (D5B1) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
人分裂周期蛋白23(CDC23)酶联吸附测定试剂盒杨生盾壳霉His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)
人着丝粒蛋白A(CENPA)酶联吸附测定试剂盒 枯草芽胞杆xCT/SLC7A11 (D2M7A) Rabbit mAb
人着丝粒蛋白E(CENPE)酶联吸附测定试剂盒 嗜热脂肪地球芽胞杆SignalStain® Apoptosis (Cleaved Caspase-3) IHC Detection Kit
人着丝粒蛋白H(CENPH)酶联吸附测定试剂盒 枯草芽胞杆Phospho-Akt (Ser473) (D9W9U) Mouse mAb
人着丝粒蛋白I(CENPI)酶联吸附测定试剂盒 白灵侧耳Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (HRP Conjugate)
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