脯氨酸脱氢酶(ProDH)微量法

脯氨酸脱氢酶(ProDH)微量法

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2022-03-09 14:25:13
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属性:
供货周期:现货;规格:100管/96样;货号:YS-01S6530;应用领域:化工;主要用途:公司产品仅供于科研使用;
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产品属性
供货周期
现货
规格
100管/96样
货号
YS-01S6530
应用领域
化工
主要用途
公司产品仅供于科研使用
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上海研生实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

商品属性:

产品名称

规格

检测方法

货号

脯氨酸脱氢酶(ProDH)微量法

100管/96样

微量法

YS-01S6530

商品介绍:

公司产品仅用于科研测定意义
ProDH是存在于线粒体内的催化脯氨酸降解的关键酶。脯氨酸是分布*泛的一种渗透物质,在胁迫条件下很多植物可以通过增加合成、减少降解而在体内累积大量脯氨酸,降低ProDH活性对于调节渗透平衡、防止渗透胁迫对植物造成伤害、清除自由基、保护细胞结构具有重要意义。

测定原理:

利用异硫氰酸甲酯检测ProDH催化的脱氢反应,600nm处吸光值的吸光值的变化反映酶活性的高低。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

图片1.png

试剂组成和配制:

试剂一:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃避光保存。

试剂三:液体×1瓶,4℃避光保存。

试剂四:液体×1瓶,4℃避光保存,未变成蓝绿色之前均可使用。

标准品:液体×1支(EP管中),2 μmol/mL酚标准液,4℃保存。

粗酶液提取:

1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,4℃、8000g离心10min,取上清液待测。

2. 细菌或细胞:按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3. 血液可直接测定,或者适当稀释后测定。

小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)酶联吸附测定试剂盒土库曼盐土生古Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) (65E4) Rabbit mAb

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测定步骤:

1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到510 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。

3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸馏水,40μL试剂二,40μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;加入试剂四120μL,混匀后于510nm测定吸光度,记为A空白管。

4. 标准管:取EP管,加入4μL标准品,40μL试剂二,40μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;加入试剂四120μL,混匀后于510nm测定吸光度,记为A标准管。

5. 对照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸馏水,40μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;加入试剂四120μL,混匀后于510nm测定吸光度,记为A测定管。

6. 测定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL试剂二,40μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;加入试剂四120μL,混匀后于510nm测定吸光度,记为A测定管。

其中标准管和空白管只需做一管,测定管和对照管每个样均需做。

注意:空白管和标准管只需测定一次。



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