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原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
产品名称 | |
英文名称 | Radix aristolochiae fangchi |
货号 | BJ-P988360 |
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
盐酸地匹福林(标准品)英文名称: Xanthophyll产品别名: 三氟甲磺酸钬
盐酸地匹福林杂质A(标准品)英文名称: Xanthophyll产品别名: 伊班膦酸钠一水合物
盐酸丁卡因(标准品)英文名称: Ticagrelor产品别名: 4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
盐酸丁卡因杂质(对丁氨基苯甲酸)(标准品)英文名称: Ticagrelor产品别名: 2-嘧啶甲脒盐酸盐
盐酸丁咯地尔(标准品)英文名称: Ramosetron HCl产品别名: 2-氨基-3-基-5-甲基噻吩
盐酸丁螺环酮(标准品)英文名称: Sevelamer HCl产品别名: (R)-兰索拉唑
盐酸度洛西汀(标准品)英文名称: Sevelamer carbonate产品别名: 磷酸镉
盐酸多巴酚丁杂质(标准品)英文名称: Nifuroxazide产品别名: 氨基磺酸钠
盐酸多柔比星/盐酸阿霉素(标准品)英文名称: Nifuroxazide产品别名: N-苯甲酰基-L-精氨酸
盐酸多塞平(标准品)英文名称: Cepharanthine产品别名: 4-乙基苯磺酰
盐酸多沙普仑(标准品)英文名称: Cepharanthine产品别名: N-三苯甲基咪唑
盐酸多佐;盐酸杜塞酰(标准品)英文名称: Caspofungin Acetate产品别名: 四氟酸硝酰阳离子
LAMTOR1蛋白抗体 Atorvastatin Lactone 质量规格:>98%,BR
LIM结构域结合蛋白3抗体 Atorvastatin Acyl-β-D-glucuronide 70%, contains up to 30% lactone 质量规格:>98%,BR
ILK结合蛋白LIMS2抗体 Defluoro Atorvastatin Sodium Salt 质量规格:>98%,BR
淋巴特异性接头蛋白抗体 Atorvastatin-d5 Lactone 质量规格:>96%,BR
表面免疫球蛋白样转录因子4抗体 Atorvastatin tert-Butyl Ester 质量规格:>98%,BR
淋巴抗原6重复位点蛋白G6F抗体 Atorvastatin Methyl Ester 质量规格:>98%,进分
桩蛋白抗体 Azelastine-13C,d3 质量规格:>98%(HPLC),BR
脂蛋白受体相关蛋白/低密度脂蛋白相关蛋白的相关蛋白1抗体 N-Desmethyl Azelastine 质量规格:工业级
皮屑样蛋白2抗体 (S)-Azelastine Hydrochloride 质量规格:>98%,BR
广防己染料法PCR鉴定试剂盒说明书白被黑蛋巢Human NLRP2 ELISA Kit拉丁属名: Cyathus pallidus
根瘤菌Human NEDD4L ELISA Kit用途: 固氮
嗜酸乳杆菌Human NFIB ELISA Kit拉丁属名: Lactobacillus acidophilus
中慢生华癸根瘤菌Human NEK11 ELISA Kit用途: 与紫云英共生结瘤固氮
毛木耳(紫木耳、黄背木耳)Human NEK3 ELISA Kit拉丁属名: Auricularia polytricha (Mont.) Sacc.
支气管败血波氏菌Human NEK9 ELISA Kit拉丁属名: bronchiseptica
运动节杆菌Human NELF ELISA Kit拉丁属名: Arthrobacter agilis
白僵菌Human CDKN2A(Cyclin-dependent kinase inhibitor 2A, isoforms 1/2/3) ELISA Kit用途: 害虫生物防治
酿酒酵母Human CCK(Cholecystokinin) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为:待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。