一、高压蒸汽灭菌锅使用方法
1、首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜；
2、放回灭菌桶，并装入待灭菌物品，注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果，三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞；
3、加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内，再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧*，勿使漏气；
4、用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气，待冷空气*排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升，当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间，本实验用1.05kg/cm2，121.3℃，20分钟灭菌；
5、灭菌所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品，如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染；
6、将取出的灭菌培养基放入 37℃温箱培养24小时，经检查若无杂菌生长，即可待用。
二、高压蒸汽灭菌锅注意事项
1、灭菌完毕后须等到压力表指示为“0”时再打开上盖，当灭菌室有压力时，联锁手柄不能提起，不可强制开门；
2、灭菌液体时不可快速泄压，待液体温度降到70℃以下时，才能开门。禁止灭菌后立即开门；
3、探头、水位计要定期清洗；
4、进汽口不可堵塞，门框、胶圈无损坏，每天使用完后在胶条上涂滑石粉，以延长胶条寿命；
5、排水阀每月清洗一次，以利于排冷气，保持温度；
6、使用一年后，每年要请有资格的检测部门做一次全面系统的检查；
7、不能*依靠自动水位保护，应经常注意水位，以免烧坏电热管。