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一、大肠菌群微生物检测板产品介绍
1、原理及适用范围
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一,目前已被广泛应用于食品卫生检验工作中。大肠菌群多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,大肠菌群数的高低,表明了食品及食品生产过程中受污染的程度。大肠菌群检测板含有培养基、大肠菌群特异性酶的显色指示剂和高分子吸水凝胶,运用微生物检测板专有技术,做成一次性快速检验产品。本产品适合于食品及原料中大肠菌群的计数,如消毒牛乳、冷饮和调味品等样品的检测,也可用于表面的卫生检测。
执行标准:中华人民共和国国家标准《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》(GB 4789.3);中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《食品中大肠菌群和大肠杆菌快速计数法——PetrifilmTM 检测板法》(SN/T 1896)。
2、大肠菌群微生物检测板操作方法
2.1 样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225 mL灭菌磷酸缓冲液(或生理盐水)的取样罐或均质袋内,制成1:10的样品匀液,根据样品污染程度及检验需要,可进一步制成10倍递增的样品稀释液。
2.2 接种:一般食品2~3个适宜的稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。将大肠菌群检测板置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1 mL样品匀液滴加到检测板内,迅速贴好上层膜并水平晃动检测板,让样品匀液均匀吸附在滤纸上,静置10 s左右,待样品匀液被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两片。做好空白阴性对照。
2.3 培养: 将检测板叠在一起,倒置放于培养箱内。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。
3、结果判读
培养后纸片上的蓝色菌落为大肠菌群菌落,菌落数适中(15~150CFU)的纸片进行计数。
两个检测板的平均菌落数乘以稀释倍数即为每克(或每毫升)样品中的大肠菌群菌落行程单位数。
如果所有的稀释度检测板上的菌落数都小于15CFU,则计数稀释度较低的检测板上的平均菌落数乘以稀释倍数报告;
如果所有的稀释度的检测板上均无菌落生长,则以小于1乘以较低稀释倍数报告;
如果较高稀释倍数大于150CFU的检测板时,可计数一半或者1/4,然后再乘以2或者4,即为检测板上估算的菌落数。
报告单位以CFU/g(或CFU/mL)表示。
4、附加说明
4.1大肠菌群检测板不但可以大大缩短检测时间,而且检测结果与传统方法很接近,符合率可达90%左右。
4.2 如果样品的酸碱度pH 7.0以下时,应先用灭过菌的碱性溶液(如1 mol/L NaOH)调节到pH6.5~7.5。
4.3 注意使用过的检测板上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。