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标记细胞膜及脂溶性生物结构菁类染料DiR,DiI, DiO, DiD

时间:2021-04-29      阅读:751

DiI, DiO, DiD和DiR作为一类长链的亲脂性二烷基碳菁类染料(Dialkylcarbocyanines)荧光染料家族,用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构。作为一类环境敏感型荧光染料,当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子(例如蛋白质,虽然在水中其荧光强度很弱)结合时,其荧光强度显著增强。一旦进入细胞后,它们在细胞内质膜中逐步扩散,于最佳浓度条件下可将整个细胞均匀染色。这些染料具很高的淬灭系数,偏光依赖性和很短的激发寿命。

四种染料呈现不同的荧光颜色,DiI(橙色荧光)DiO(绿色荧光)、DiD(红色荧光)、DiR(深红色荧光),为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiO和DiI分别用标准FITC和TRITC滤光器检测,可结合使用。DiD可被633 nm氦-氖(He-Ne)激光激发,具有比DiI更长的激发和发射光波长,特别适合用于标记具本底荧光的细胞和组织。而DiR在体内活体成像或者示踪中意义非凡,因其所发射的红外光可以高效地穿过细胞和组织,并且在红外光范围内,其本底荧光水平很低。

本品以DiR的碘盐形式提供,

英文名:1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyaineiodide,

纯度≥95%,适用于荧光检测研究。

温馨提示:本产品由陕西新研博美生物科技有限公司提供,该产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究。

厂  家:陕西新研博美生物科技有限公司

请点击此处进入陕西新研博美生物科技有限公司展台查看

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使用方法:

1、染色液制备:

(1)配置DMSO 或 EtOH 储存液:储存液用 DMSO 或 EtOH 配置浓度 1~5 mM。

注:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融。

(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS 或 PBS)稀释储存液,配制浓度为 1~5μM 的工作液。

注:工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。 建议从推荐浓度的 10 倍范围内开始*浓度的摸索。

2、悬浮细胞染色:

(1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为 1×10 6 /mL。

(2)37℃ 孵育细胞 2~20 min,不同的细胞最佳培养时间 不同。可以20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得 到均一的标记结果。

(3)孵育结束,1000~1500 rpm离心5 min。倾倒上清液, 再次缓慢加入37 ℃预热的生长培养液重悬细胞。

(4)重复步骤(3)两次以上。

3、贴壁细胞的染色:

(1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但表面要 保持湿润。

(3)在盖玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液,轻轻晃动 使染料均匀覆盖所有细胞。

(4)37℃ 孵育细胞 2~20 min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20 min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。

(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片 2~3 次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10 min,然后吸干培养基。但要使表面保持湿润。

温馨提示:本产品由陕西新研博美生物科技有限公司提供,该产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究。

纯 度:95%

储存/保存方法:−20°C干燥避光保存,产品有效期为12个月

技术指标:

Ex(nm):748

Em(nm):780

注意事项:

1、荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作

基本信息:

别 名:细胞膜荧光探针DiR, DiR细胞膜染料, DiR 碘化物;DiIC18(7)

外 观:蓝色至深蓝色油状固体

可溶性/溶解性:溶于DMF,DMSO,甲醇

参考文献:Cheng Z, et al. (2004). Differential control over postganglionic neurons in rat cardiac ganglia by NA and DmnX neurons: anatomical evidence. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 286, R625-33; Koo YE, et al. (2004). Real-time measurements of dissolved ox

分子结构图:

DiR 结构式

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