抗万古霉素肠球菌（VRE）显色培养基使用说明书

法国科玛嘉VRE显色培养基

用于耐万古霉素粪肠球菌（E.faecalis）和尿肠球菌(E.faecium)的鉴定和计数。

【组分】

琼脂                               15.0g/L

蛋白胨和酵母浸出物                 20.0 g/L

色素                               27.3 g/L

盐类                               5.0 g/L

PH                                6.8±0.2

根据需要，可以进行经典配方的调整或补充。

【操作】

1. 称取瓶内干粉67.3g，用1000ml蒸馏水或纯水溶解，可以按照67.3 g/L的比例扩大或 缩小。
2. 将上述干粉缓慢倒入蒸馏水中，充分搅拌直至琼脂*溶解。
3. 加热至100℃，并且不断搅拌。如果使用高压锅，请不要加压，加热不能超过100℃。使用微波炉加热时，在煮沸后立即移出微波炉并不断搅拌，而后移入微波炉再加热，直至*溶解（大气泡代替泡沫产生，大约需要2分钟）。
4. 把VRE基础培养基冷却至45－50℃备用，此基础培养基为乳白色。
5. 取增补剂一瓶，加入1ml 54%酒精溶解，以无菌操作把增补剂加入到备用的基础培养基中，轻轻混合均匀(使其终浓度为60mg/L)，避免气泡，也可按照60mg/L的比例扩大或缩小 。
6. 使用倾注程序：准备直径为90mm的已灭菌的带盖培养皿，每个培养基接种1ml样品，然后倾注混合均匀的培养基 15±1ml，混合均匀使其凝固，倒置，37℃培养16小时 ,24小时 和48小时，观察结果 。
7. 如果使用表面接种程序：将培养基倾注于已灭菌的培养皿中（用前贮存于2－8℃，避光，接种前应先恢复至室温）。样品划线接种或者涂布接种于 培养基表面，在37℃培养18小时，24小时和48小时，观察结果。

【贮存】

1、法国科玛嘉VRE显色培养基干粉需保存在15-30℃干燥环境中，增补剂保存于2－8℃环境下。

2、倾注好的培养基在室温可保存一天，2－8℃冰箱中避光可以贮存两星期。

【结果】

★ 极少数其他菌属菌株如乳酸杆菌素可能呈现很小的紫色菌落。

★ 使用过的培养基需要在121℃灭菌至少20分钟才可以按照有关规定丢弃。