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纤连蛋白(Fibronectin)重组蛋白介绍

时间:2022-09-01      阅读:683

重组人纤维连接蛋白片段(Recombinant human fibronectin fragment,以下简称Fibronectin)为一段人工重组蛋白,由574个氨基酸组成,分子量约为63kDa。

纤连蛋白(Fibronectin)包括三个功能区 :

[1] C-Domain:细胞粘附区域,含RGD序列,又称细胞结合域(central cell-binding domain)

[2] H-Domain:提供病毒粘附,又称肝***脂结合域(heparin-binding domain)

[3] CS-1位点:提供细胞粘附功能


纤连蛋白(Fibronectin结构如下图所示

Fibronectin·-1.png


纤连蛋白(Fibronectin应用

1. 提高逆转录病毒、慢病毒的转染效率

作用原理如下:

细胞表面VLA-4及VLA-5可分别与Fibronectin上的CS-1 位点及C-Domain结合,逆转录病毒载体可以与H -Domain结合。在经Fibronectin包被的培养容器表面,细胞与病毒载体以高浓度共存,从而显著提高病毒的转染效率30~70%。


2. 促进细胞黏连粘附及刺激细胞增殖

细胞的黏连是机体结构得以维持、细胞生长完成的必要条件,研究结果表明:Fibronectin作为细胞培养的基质,可以促进细胞的黏连生长,使多种细胞的贴壁率达到90%以上(对照组为10%),细胞形态结构良好,细胞的代谢率增强,DNA、RNA及蛋白质合成速度提高约5倍,细胞的集落率升高几倍,原代培养的成活率明显提高,细胞生长时间缩短。


同时,Fibronectin能刺激细胞上千倍的增殖。作用原理是: Fibronectin和抗CD3抗体可分别与T淋巴细胞上的VLA和TCR结合, 两者共同作用激活酪氨酸激酶pp125FAK,通过Ras途径刺激T细胞的增殖和分化,使其获得上千倍的增殖。

3. 其它应用

研究还证明,Fibronectin能提高细胞的融合率,缩短融合周期,可应用于许多科研中,如应用于细胞杂交瘤技术等。将Fibronectin涂到微球载体上作为细胞大量生产的介质,可以节省空间,节省原材料,成为应用培养细胞技术来生产新药品的基础物质。


赛尔瑞成提供高品质重组人Fibronectin,是在符合GMP标准要求的洁净间由原核系统表达、经分离纯化和过滤除菌等步骤制成 ,分子量约为63.0 kDa。该产品具有高纯度,高活性,低内毒素的特点 ,并通过 ISO9001、ISO13485质量体系双重认证。

重组人Fibronectin产品特点

纯化自重组 E.coli 菌株,其中携带有编码人纤维连接蛋白片段的质粒

无血清无动物来源

内毒素水平:<1 EU/μg

纯度:经SDS-PAGE电泳检测纯度>95%


Fibronectin-3.png

生物学活性: 在促进小鼠3T3细胞的粘附和增殖实验中,我公司生产的重组人Fibronectin表现出较好的促增值活性,结果如下图所示:

Fibronectin-4.png

赛尔瑞成高品质重组细胞因子

GMP条件生产 | ISO9001、ISO13485质量体系双认证 | 重组表达工艺

高纯度>95%,高活性,低内毒素<1EU/μg

赛尔瑞成技术团队常年从事抗体和重组蛋白的开发工作, 曾承担国家“863”计划项目、国家重大新药创制项目、国家自然科学基金项目、省级科技攻关计划项目等 ,每年为客户提供200 多种重组蛋白和重组抗体定制服务。

目前,赛尔瑞成已研发出几十种高品质重组细胞因子, 产品均具有高纯度>95%,高活性,低内毒素<1EU/μg的特点 ,已广泛应用于细胞培养相关研究和工业化生产领域,并得到了大量客户的认可。


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