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TAPSO
别名 : 3-[N-三(羟甲基)甲an)-2-羟基丙磺酸T
CAS : 68399-81-5
分子式 : C7H17NO7S
分子量 : 259.28
储存条件 : 室温干燥
纯度 : ≥99.0%
外观(性状) : 白色结晶粉末
单位 : 瓶
TAPSO
等级:生化级
质量标准:
外观:白色结晶粉末
含量(滴定):≥99.0%
水分:≤1.0%
溶解性(0.1M水溶液):清澈无色溶液
PH1%DiH2O:4.7-5.3
产品应用:在生物实验中,它是重要的PH稳定试剂,通常选择适当的弱酸和其共轭碱混合以得到适合的PH值。大多数生物反应在中性条件下发生,一般PH选在6-8之间,并且要求缓冲剂有效缓冲范围也在6-8之间。另外要求缓冲剂的酸碱形式不与某些金属离子发生螯合作用。
慢病毒感染快速指南
1. 将目的细胞按 30%汇合度接种到 24 孔板,约 3-5×104细胞数/孔,不同细胞因为细胞大小不同细胞数量会不同,快速指南以细胞数量为 5×104为例,加入 500uL wan全培养基进行细胞培养。
2. 接种后 12-20h 感染阴性对照慢病毒(接种细胞至病毒感染细胞时间不宜太长,否则细胞增殖影响细胞密度不利用后期抗性筛选)。
3.加病毒量计算方法:(细胞数×MOI 值/病毒滴度)×103=病毒量(uL),加病毒量见下表。同时加入 Polybrene,每孔加 0.25uL,浓度为 10mg/mL Polybrene,细胞培养液中终浓度为5ug/mL。
4.感染 16-20h 后更换培养基,弃去培养基,每孔加入 500uL 新鲜的培养基。
5.感染后 48-96h 显微镜观察荧光。(注:如果 48h-96h 期间细胞汇合度达到 100%,请及时传代培养)。
6.建议将 48 孔板细胞进行传代,传代 12 孔板,后继续观察荧光,根据细胞状态和荧光细胞比例综合判断细胞感染最佳 MOI 值。一般选择细胞生长良好,感染效率 80%左右的感染条件作为最佳感染条件。(注:100%荧光感染不一定为细胞最佳 MOI 值,因为可能会造成细胞慢病毒感染拷贝数太高,影响细胞状态。