高灵敏ECL发光试剂 Western Chemiluminescent HRP Substrate

Cat No. KTSM1901

简介：
本ECL试剂盒是基于鲁米诺（luminol）的高灵敏底物体系，用于在免疫印迹实验中检测辣根过物氧化酶（HRP）。试剂盒中的增强剂使得本试剂盒能检测fg至pg级抗原，背景干净。可以使用X光片或化学发光成像仪进行检测。由于本产品灵敏度高，检测丰度高的抗原，如actin等时，应适当降低一抗及二抗的浓度。

高灵敏ECL发光试剂运输和保存条件：
室温运输。收到试剂后请避光，4度保存。室温保存时，底物可以稳定保存6个月；4度保存时，可以保存1年以上。

产品组成：
超敏ECL发光剂/增强剂，50ml
超敏ECL过氧化物/稳定剂，50ml

高灵敏ECL发光试剂注意事项：
1. 为获得结果，请优化实验条件，包括样品，封闭试剂，洗涤液，一抗，二抗的选择及孵育时间等。
2. 在转膜，封闭，洗涤及一抗二抗孵育过程中防止膜干掉。
3. 为保证结果，请使用使用脱色摇床等设备，充分洗涤一抗二抗等。
4. 由于抑制HRP的活性，请尽量避免使用,尤其在二抗孵育时，不能加叠。
5. 与膜接触时，请使用干净的手套或镊子，避免蛋白污染。
6. 底物尽量现配现用。在室温条件下，配制好的底物可以稳定8小时。避免强光照射底物。短时间日光灯照射不影响配制好的底物的效果。

高灵敏ECL发光试剂使用方法（X光片）：
1. 根据样品中抗原的浓度及一抗的效价，用一抗孵育印迹膜室温2小时或4度过夜。
2. 充分洗涤后，二抗室温孵育1小时。再充分洗涤后。
3. 按需要量将发光剂和过氧化物按1:1比例充分混匀得到发光物工作液。按1平方厘米印迹膜0.1ml工作液准备。
4. 弃去洗涤液，将工作液加到印迹膜上，孵育5分钟。
5. 将印迹膜取出，并吸去多余的工作液。
6. 将印迹膜放置于两层干净的保鲜膜或塑料保护壳之间，去除其中的气泡。
7. 将印迹膜吸附蛋白的面向上放置，置于X光片盒中，在暗室内压上X光片适当的时间。进行显影和定影。

使用方法（化学发光成像仪）：
1. 第1-5步与X光片方法相同。
2. 将印迹膜放置于成像仪的合适位置。
3. 选择信号累积模式采集信号。

常见问题，可能原因及解决方案