伊红染液是一种酸性生物染料 ，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。为1%的水溶液。

伊红染液使用说明：

1. 样品处理

a) 对于石蜡切片：

二甲苯中脱蜡5-10分钟。

换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。

无水乙醇5分钟。

90%乙醇2分钟。

70%乙醇2分钟。

蒸馏水2分钟。

b) 对于冰冻切片：

蒸馏水2分钟。

c) 对于培养细胞：

用4%多聚甲醛固定10分钟以上。

蒸馏水洗涤2分钟。

换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。

2. 伊红染色

对于上述处理好的样品：

伊红染色液染色染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。

此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。

注：如果用于免疫组化等染色后的复染，可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行伊红染色。

3. 脱水、透明、封片或进行其它染色

a) 脱水、透明、封片：

95%乙醇脱水2分钟。

换用新鲜的95%乙醇再脱水2分钟。

二甲苯透明5分钟。

换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。

用中性树胶或其它封片剂封片。

显微镜下观察，细胞浆呈粉红色或红色。

b) 进行其它染色：

如果进行免疫荧光染色，或进行Hoechst等荧光染料的染色，在伊红染色液染色后：

70％乙醇洗涤2次，每次2分钟。

PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。

然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。

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