天狼猩红染色服务(Picrosirius Red )可用于区分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型胶原,由于天狼猩红是一种强酸性阴离子染料,可与呈碱性的胶原反应,使胶原纤维在偏振光照射时,产生明显的双折光现象。组织切片天狼星红染色服务不同的胶原纤维具有不同的旋光性,在偏振光显微镜下呈现相异的颜色,借以区分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型胶原,Ⅰ型纤维:紧密排列, 显示很强的双折光性。
胶原纤维(Collagen Fiber)是结缔组织中分布含量多的一种纤维,广泛分布于各种脏器,其中皮肤、巩膜、肌腱。Ⅰ型胶原纤维主要是骨、皮肤、肌腱纤维;Ⅱ型胶原纤维主要是软骨胶原;Ⅲ型胶原纤维主要在胚胎组织、成人血管、胃肠道;Ⅳ胶原纤维主要在基膜中。天狼星红与其衬染液都是强酸性染料,易与胶原分子中的碱性基团结合,吸附牢固。偏振光镜检测,胶原纤维有正的单轴双折光性的属性,与天狼星红复合染色液结合后,可增强双折射,提高分辨率,从而区分两型胶原纤维。
组织切片天狼星红染色服务也就是天狼星红染色病理检测是生物病理平台实验组成之一, 作为常见病理实验,日常实验之一。病理实验由从事生物实验专业,经验丰富的人员进行操作。
主要是进行组织形态观察,其结果通过照片形式展现。通过对组织形态观察,了解实验结果,验证实验结果,对后续实验进行把控等。
组织切片天狼星红染色服务实验步骤:
(1)石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯I 20min-.二甲苯| 20min-无水乙醇| 10min-无水乙醇11 10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。
(2)天狼猩红染液浸染:将水洗过的切片入天狼猩红染液浸染1h。
(3)酒精分化脱水:片子直接入纯酒精分化脱水。
(4)透明封片:二甲苯| 5min-二甲苯I5min中脱水透明,中性树胶封片。
组织切片天狼星红染色服务染色结果:
应用偏光显微镜观察胶原纤维:
Ⅰ型胶原纤维:紧密排列,很强双折光性,纤维呈红色。
Ⅱ型胶原纤维:弱双折光性,纤维呈多种颜se网状分布。
III型胶原纤维:弱双折光性,纤维呈绿色。
III型胶原纤维:弱双折光性,纤维呈淡黄色。
组织切片天狼星红染色服务实验技巧:
(1)天狼猩红染色易掉色,应及时封片。
(2)注意染液的使用情况。
组织切片天狼星红染色服务红染色液主要由天狼星红染色液、Mayer染色液组成,主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中,在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色,在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,但所用抗体昂贵,操作费时,而采用天狼星红染色试剂便宜,操作简单。
送样运输要求:
1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。
2.石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。