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一、Morris水迷宫实验仪器实验原理:
本实验由美国科学家RichardGMMorris于1981年建立。初用于研究脑内结构对学习和记忆的调节作用,后来逐步发展成为目前较为常用的评价动物学习与记忆的模型。这一实验的基础是,啮齿类动物在水中有强烈的逃避水环境的动机,并以较快、直接的途径逃离水环境。学会逃避水环境的过程体现动物的学习能力;根据周围环境进行空间定位,有目的地游往水中安全的地方(平台),体现动物的空间记忆能力。
二、实验装置:
Morris水迷宫实验仪器由硬件和软件两部分组成:
硬件主要包括:Morris水迷宫水池(采用ABS工程塑料,大鼠直径1.6米,小鼠直径1.2米,高度均为50cm)、恒温加热系统、数显温控表、方向标识物、泛光窗帘、手动升降站台、摄像系统、无线遥控升级站台(选配)、枪式摄像机等。
软件:自主研发的SuperMaze软件。
三、实验方法:
Morris水迷宫实验分获得性训练、探查和对位训练3个过程。
1.获得性训练理论上将水池分为4个象限,平台置于其中一个象限区的中央。
(1)将动物(大鼠或小鼠)头朝池壁放入水中,放入位置随机取东、西、南、北四个起始位置之一。记录动物找到水下平台的时间(s)。在前几次训练中,如果这个时间超过60s,则引导动物到平台。让动物在平台上停留10s。
(2)将动物移开、擦干。必要时将动物(尤其是大鼠)放在150W的白炽灯下烤5min,放回笼内。每只动物每天训练4次,两次训练之间间隔15~20min,连续训练5d。
2.探查训练:后一次获得性训练结束后的第二天,将平台撤除,开始60s的探查训练。将动物由原先平台象限的对侧放入水中。记录动物找到目标象限(原先放置平台的象限)所花的时间和进入该象限的次数,以此作为空间记忆的检测指标。
3.对位训练:测定动物的工作记忆(workingmemory)。探查训练结束后的第二天,开始维持4天的对位训练。将平台放在原先平台所在象限的对侧象限,方法与获得性训练相同。每天训练4次。每次记录找到平台的时间和游泳距离以及游泳速度。
4.对位探查训练:后一次对位训练的第二天进行。方法与上述探查训练类似。记录动物60s内动物在目标象限(平台第二次所在区)所花时间和进入该区的次数。
四、实验数据:
指标类型 | 指标参数 |
通用指标 | 游泳距离、运动速度、游泳时间 |
区域指标 | 各象限运动路程、逗留时间、*进入时间、进入次数 长访问时间、短访问时间、进入前总路程、*离开时间 |
特色指标 | 上站台潜伏期、搜索策略、接近站台时间 与站台大距离、与站台小距离 |
其他指标 | 轨迹图 |
五、注意事项:
1.对比食物驱动的模型(如放射臂迷宫),水迷宫实验的优点在于,动物具有更大的、逃离水环境的动机。而且不必禁食,特别适合老年动物的测试。加上它对衰老引起的记忆减弱尤其敏感,因此,水迷宫较常用于老年动物记忆的研究。
2.如用小鼠,除游泳池尺寸约为大鼠的50%以外,平台直径也较少(7.5cm)。实验方法与大鼠类似,但训练周期较短。一般获得性训练3天共训16次(*天4次,后两天每天6次;两次训练之间的间隔5~10min,第四天为探查训练,第五、六天为对位训练,每天训练六次,第七天为第二次探查训练。
3.如用肉眼观察,在所有试验过程中试验着始终坐在同一位置,距离泳池近的边缘约60cm。
4.每天在固定时间测试。操作轻柔,避免不必要的应激刺激。
5.当与其他同类实验相比较时,要注意到动物的性别、品系、泳池的尺寸和水温等多种因素对实验结果的影响。此外,当以游泳速度作为观察指标时,要考虑到动物的体重、年龄以及骨骼肌发育状况等对游泳速度可能造成影响。
6.用老年动物进行实验时,应确认动物的游泳能力和视力不因年龄增大而影响行为操作。其方法如下:将平台露出水面以使动物能够看见平台。动物放入泳池后如毫无困难地直接游向平台,说明动物的游泳能力和视力均正常,可以开始实验。
7.游泳对动物是一个较大的应激刺激,可引起神经内分泌的变化。这些变化可能对实验结果造成干扰。对老年动物,严重时可诱发心血管疾病而导致卒中甚至死亡。因此,必要时可将动物多次放入泳池或适当延长其游泳时间以增加动物对游泳的适应能力。
8.当用牛奶或奶粉搅浑泳池的水时,要定期换水以免水变质。
六、发展介绍:
Morris水迷宫(Morriswatermaze,MWM)实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻找隐藏在水中平台的一种实验,Morris水迷宫主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力,被广泛应用于学习记忆、老年痴呆、海马/外海马研究、智力与衰老、新药开发/筛选/评价、药理学、毒理学、预防医学、神经生物学、动物心理学及行为生物学等多个学科的科学研究和计算机辅助教学等领域,在世界上已经得到广泛地认可,是医学院校开展行为学研究尤其是学习与记忆研究的优选经典实验。