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刚果锥虫染料法探针法PCR试剂盒
产品介绍:聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR),是体外酶促合成特异DNA片段的一种经典方法,由变性、退火及适温延伸组成,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点,是分子生物学实验的基本实验技术。
如何选择刚果锥虫染料法探针法PCR试剂盒:RT-PCR是指将RNA 的反转录(RT)和cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。利用逆转录酶将RNA逆转录(RT)成cDNA(Complementary DNA),再以cDNA 为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR的常见应用包括基因检测、转录物变异检测,以及克隆和测序用cDNA模板制备。
PCR反应鉴定——PCR反应条件
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
注:
a)退火温度:请参考引物的理论 Tm 值,退火温度可设置低于引物理论值 2-5℃。
b)延伸时间:需要根据片段的长度来确定,对于1 kb以内的DNA片段,建议延长时间为30 sec。
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