如何提高立体显微镜的分辨率呢
时间:2019-11-26 阅读:1501
立体显微镜由于试样被观察表面与工作台表面重合,因此与试样高度无关,使用方便,仪器结构紧凑,外形美观大方,仪器底座支承面积较大,弯臂坚固,使仪器的重心较低安放平稳可靠,由于目镜与支承面呈45°倾斜,使观察舒适。
用于鉴别和分析各种金属和合金材料的组织结构,立体显微镜广泛应用在工厂或实验室进行铸件质量的鉴定;原材料的检验或材料处理后的金相组织分析;以及对表面喷涂等一些表面现象进行研究工作,对热处理后的材料作一般金相组织的研究工作。显微镜成像清晰,视野宽广,整体设计符合人机功能,适合长时间操作。
人眼的分辨率只有1/10mm,那么比1/10mm小的物体或比1/10mm近的两个微小物体的距离,人眼就无法分辨了。所以出现了从简单的宏观放大镜到微观观测的光学显微镜,继而电子显微镜。立体显微镜的分辨率定义是指在标本上能清楚分辨的两个小点之间的小距离。其计算公式为:
D=0.61λ/NA
式中:D为分辨率(um);λ为光源波长(um);NA为物镜的数值口径(也称镜口率)。
由公式可得到,立体显微镜的分辨率决定于入射光源的波长以及所匹配物镜的数值孔径。由此可知,提高光学显微镜的方法:
1、增加物镜的数值孔径NA.
数值孔径NA=n*sin(u)
式中,n为物镜与标本之间的介质折射率;u为物镜的二分之一孔径角。因此,从光学设计上适当采用较大的孔径角,或者增大折射率成为常见的提高立体显微镜分辨率的方法。一般低倍物镜如10X以下其介质采用空气,折射率为1,即干燥系物镜;水浸介质是蒸馏水,其折射率为1.33;油浸物镜介质是香柏油或其它透明油,其折射率一般在1.52左右,接近透镜和载玻片的折光率,如Olympus的100X油镜。水浸物镜和油浸物镜不仅放大倍数高而且由于使用高折射率的介质,从而提高物镜的分辨率。
2、降低光源波长。
可见光较短波长为390nm,若用此波长的紫外光作为照明光源,可使光学显微镜的分辨率降低至0.2um。但是由于大多数普通材料的玻璃会大量吸收340nm以下波长的光,紫外光经过大量衰减无法形成清晰、明亮的图像。因此不得不使用石英(可透过低达200nm的紫外光)、荧石(可透过低达185nm的紫外光)等价格昂贵的材料,并且紫外光显微镜不能用肉眼进行观察,甚至受观测样品的限制,再加上昂贵的造价,所以这种提高立体显微镜分辨率的方式由于其自身的局限性而不受广泛应用。