超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒分光光度计法使用说明
时间：2020-05-18 阅读：1818
超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒
(A002-96T分光光度计法)
一.测定原理
该方法利用NADH-PMS-NBT为超氧阴离子(O2·-)生成系统，超氧阴离子清除剂能减少NBT的蓝色。通过检测560nm处吸光值可判断体系中还原物质的还原能力。
二.试剂组成
试剂一：液体40mL×1瓶；
试剂二：液体1mL一瓶；
试剂三：粉剂一支；
试剂四：粉剂一支；
试剂五：1mg/mL芦丁标准品，1mL。
三.储存条件及有效期
试剂盒-20℃可保存6个月。
四.试剂的配制
试剂一工作液：用时加双蒸水360mL，也就是10倍稀释，得到400mL试剂一工作液；
试剂二工作液：用赠送的棕色瓶配制。试剂二工作液由试剂二加上100mL试剂一工作液配得，现配现用，注意避光；
试剂三工作液：试剂三工作液由试剂三溶解于100mL试剂一工作液配得，现配现用；
试剂四工作液：粉剂一支。用50mL双蒸水溶解，摇匀后，取10mL，加入90mL试剂一，配成试剂四工作液，现配现用，用赠送的棕色瓶盛装。注意避光，配好的试剂请于2小时内用完。
试剂五：阳性对照，按需配制，-20℃保存。
五.操作步骤
| 空白孔1 | 测定孔 | 对照孔2 |
试剂一（mL） | 1 |
| 1 |
试剂二工作液（mL） | 1 | 1 | 1 |
试剂三工作液（mL） | 1 | 1 |
|
样品（mL） |
| 1 | 1 |
充分混匀
试剂四工作液（mL） | 1 | 1 | 1 |
充分混匀，室温避光静置5min使之充分反应。560nm处，1cm光径比色杯，采用分光光度计测定吸光值。