R-SHM芯片除酶除热原流程
时间:2023-02-13 阅读:295
脂质纳米粒LNPs作为mRNA递送的首先载体。LNPs主要通过阳离子的磷脂材料与其他辅助磷脂完成颗粒的构建,通过RNA所带的负电与阳离子磷脂的正电相互吸附,可实现较高的包载效果,并且在体内由低密度脂蛋白介导的胞吞机制可使纳米粒子成功被细胞摄取,实现良好的细胞摄取效果。
R-SHM处方工艺筛选芯片盒,使用次数根据不同的测试条件可以>30次*或>100次**。
备注:
*采用处方BNT空白LNP处方测试,测试条件为1:3,总流速12ml/min,总体积为10ml,粒径和PDI能保持一致。
**采用纯乙醇测试,测试条件为1:1,总流速20ml/min,总体积为10ml,芯片无泄露。采用BNT处方,粒径和PDI能与新芯片保持一致。
流速范围:1ml/min-20ml/min。
R-SHM芯片除酶除热原流程
试剂
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75%乙醇,
0.5MNaOH 溶液,
无水乙醇,
DEPC 水
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1、芯片使用前清洗
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01
75%乙醇清洗
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用 2 支 2.5ml 注射器各取 2ml 75%乙醇,
调用“清洗程序”的方法
(两相比例=1:1,总体积 4ml,流速 12ml/min)
取 15ml 离心管挂上机器左边的收集管卡槽
点击软件运行。
02
0.5MNaOH 溶液清洗
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用 2 支 2.5ml 注射器,
各取 0.5MNaOH 溶液,
重复上述操作条件清洗。
清洗后静置 1小时。
03
残余液体排空
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用 2 支 2.5ml 注射器,
抽满空气,
插入芯片,
重复上述操作条件排空。
04
无水乙醇—DEPC水
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用 2 支 5ml 注射器,
各取无水乙醇,DEPC 水 5ml,
软件设置
(两相比例=1:1,总体积10ml,流速 12ml/min),
具体操作如上,重复清洗 3 次,
排空残余液体。
清洗步骤:
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无水乙醇-DEPC 水清洗→
75%乙醇清洗→
0.5MNaOH 溶液清洗→
残余液体排空→
无水乙醇-DEPC 水清洗3次→
残余液体排空
注意:溶液的抽取体积应大于软件设置体积。