NGS 0602-24MICH TLX DNA-seq kit (illumina Compatible)
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Mich TLX DNA-seg kit (illumina Compatible) 是为 illumina 平台设计的 DNA 文库准备试剂盒,适用于起始量 1 ng-200 ng 的 DNA 样本，试剂盒经过精心设计和优化，能够快速构建文库(2.5-3.5小时)，有高效的文库转化率与扩增效率，已经经过多样本验证可获得优异的文库与测序数据，可用于石蜡包埋组织 DNA 样本建库。试剂盒包含了 DNA 片段化和末端修复加 A尾的预混液、连接预混液、高保真扩增预混液、短接头和含有 INDEX 的 PCR 引物(可以根据客户要求进行选配)。
(注意: 本试剂盒不可直接用不带 INDEX 的引物进行 PCR 反应)。
| 产品货号 | 名称 | 规格 |
| NGS 0602-8 | MICH TLX DNA-seq kit (illumina Compatible) | 8 rxns |
| NGS 0602-24 | MICH TLX DNA-seq kit (illumina Compatible) | 24 rxns |
| NGS 0602-96 | MICH TLX DNA-seq kit (illumina Compatible) | 96 rxns |
| 名称 | 体积(NGS 0602-8) | 体积(NGS 0602-24) | 体积(NGS 0602-96) |
| TLX Buffer Mix | 38 μL | 112 μL | 448 μL |
| TLX Enzyme Mix | 30 μL | 89 μL | 356 μL |
| TLX ligase Enzyme | 20 μL | 56 μL | 224 μL |
| TLX ligase Buffer | 76 μL | 224 μL | 896 μL |
| TLX Adapter for ILM | 20 μL | 56 μL | 224 μL |
| PCR Master Mix | 96 μL | 280 μL | 1120 μL |
使用流程
请穿实验服并戴一次性手套进行实验。
使用前请将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后充分混匀，短暂离心后置于冰上待用。
混匀时请轻轻吹打或轻轻振荡，剧烈振荡可能会造成文库产出下降。
为避免样品交叉污染，推荐使用带滤芯的一次性枪头。
推荐在带热盖的 PCR 仪中进行各步骤反应，使用前应预热 PCR 仪至反应温度附近请在洁净的实验环境下实验，避免污染。
TLX Adapter for ILM 采用短接头模式。
接头浓度: 15 uM；直接用于相应建库试剂盒连接体系里即可。
-20°C保存，使用前提前融化，尽量低温融化，避免在超过 30°的环境中融化。
建库推荐使用量: 常规 DNA投入量 100-200 ng,2uL/rxns; 其他 DNA 投入量需要适当调整接头使用量。
DNA 片段选择步骤可在接头连接后或文库扩增后进行。
当Input DNA质量> 50 ng，建议在接头连接后分选；如Input DNA 质量<50 ng，可在文库扩增后进行分选。
TLX Ligase Buffer 包含高浓度的 PEG，对双轮磁珠分选产生显著影响。因此，当在接头连接后进行片段选择，须先进行纯化步骤，再进行双轮分选步骤，如在文库扩增后进行片段选择，可直接进行双轮磁珠分选步骤。
磁珠使用前应先平衡至室温，并混匀再使用，否则会导致得率下降。
80%乙醇应现用现配，否则将影响回收效率。
6进行片段选择时，初始样品体积应尽量> 100 uL，初始样本体积越大，片段选择效果越好。
通常情况下，构建好的文库可通过长度分布检测和浓度检测来进行质量评价。
文库浓度检测可使用：基于双链 DNA荧光染料的方法，如Qubit或 gPCR 绝对定量的方法。
文库长度分布检测，可通过 Agilent Bioanalvzer 2100 等基于毛细管电泳或微控流原理的设备进行检测。
