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DNA probes-Scorpions Primers
DNA probes-Scorpions Primers
Scorpions引物利用了一种单分子机制,该机制在溶液中的作用更快,可用于实时PCR中的瞬时荧光。与分子信标类似,这些引物在PCR循环过程中不需要酶切探针。这些特性使Scorpions引物成为快速,实时PCR,终点PCR,SNP检测和基因定量的有价值的工具。
Scorpions Architecture
Scorpions primers are probe/primer hybrids unlike other FRET probes, whose design is such that they emit light only when incorporated into the PCR product during amplification. These primers incorporate two distinct structures: 1) a target-specific DNA probing sequence and 2) a target-specific PCR primer.
DNA探测序列
DNA探测元件在3'和5'末端并入了一个自我互补的茎序列,该序列将目标特定区域保持在发夹环中。 荧光团分子与5'端共价连接,而深色淬灭剂(黑洞猝灭染料)与环结构的3'端连接。 荧光团和BHQ染料通过茎结构保持紧密的物理距离,以确保在热循环之前进行有效的淬灭。
目标特异性引物
靶特异性PCR引物通过封闭部分与DNA探测序列的3'端共价连接。 该部分防止聚合酶延伸到探测元件中,这可能表现为假阳性。