Single cardiomyocyte contractility force assay，单个心肌细胞收缩力测定系统

心肌细胞钙浓度评估定量系统

读数

单轴收缩力，与力测量耦合的钙瞬变分析。

标准培养限制

当 hESC-心肌细胞在标准条件下培养时，即在 2D 单层细胞中，它们以完随机的方式组织。因此，无法量化单个心肌细胞跳动产生的单轴力。

单一心肌细胞收缩力测定的好处

在此测定中，衍生的心肌细胞附着在矩形细胞粘附区域，这会诱导细胞伸长并促进两个相邻微柱之间的悬浮细胞锚定。收缩力测定能够在体外再现导致 CM 跳动的兴奋-收缩耦合效应。

例子

hESC 心肌细胞中钙瞬变（钙敏感收缩蛋白的激活）的量化以及细胞收缩和力生成的同时测量（支柱偏转分析）。

提供力量化分析设备-微柱阵列细胞力量化分析系统

微柱培养阵列及其特点：

●每张阵列尺寸为3.2 x 3.2 mm，含10 x 18个观测点，每个观测点有170个按六边形排列的微柱

●微柱直径5 μm，高15 μm，中心间距为12 μm

●微柱弹力范围1-3 nN（有其他需求可定制）

●标准涂层是纤维连接蛋白或胶原蛋白I

●细胞外基质（EDM）蛋白包可按找需求定制

软件可用于从光学显微镜拍摄的细胞图片中提取细胞力学参数（力/微柱、微柱坐标、微柱形变、细胞的应变和应力分布等）（图3）。分析结果可保存为Excel表格，便于后续处理。

图3

测量原理：

未变形的微柱在明场图片中呈较亮的圆形，周围是较暗的边，通过霍夫变换可得到其形心。发生变形的微柱呈较暗的半月形，通过图像处理可得到微柱的形变大小（图1）。由于微柱刚度已知，所以进而可得到每根微柱产生的力。

系统组成：

1、荧光倒置显微镜：

主要用于常规活细胞成像，快速高灵敏度活细胞荧光成像，主要包括显微平台，成像系统，工作站

2、微柱阵列培养设备：

将硅胶微柱阵列刻在盖玻片上（图1 A），并包被蛋白，然后置于培养皿中（图1 B）。微柱上需要包被蛋白。标准的包被蛋白有纤连蛋白或I型胶原。若需其他包被蛋白，需提前告知。每张微柱阵列可以分析120-150个细胞，得到的数据足以进行统计学分析。每种实验条件可进行2-3次实验，这样得到的结果会更加稳定。微柱阵列本身并未进行包被，在使用前需要自行包被合适的蛋白（用户自选，可购常用的包被蛋白）。

3、光学减震台

4、预装MicroPost细胞牵引力、内源力分析软件的计算机系统:

软件可用于从光学显微镜拍摄的细胞图片中提取细胞力学参数:（力/微柱、微柱坐标、微柱形变、细胞的应变和应力分布等）；

做细胞如下力学特性分析，包括：

1)、微柱形变；

2)、细胞的应变和应力分布

3)、细胞牵引力、内源力(cell active force)

4)、主动收缩力

我们提供带有微型PDMS微柱的10毫米盖玻片，用于细胞培养和力评估。

不同的支柱设计和布置适合各种应用，例如牵引力显微镜，收缩力和旋转轴。
通过测量PDMS微柱响应于细胞施加的力的挠度来进行力评估。
>可用
直接接种细胞
>多种设计可供选择
可用高密度和低密度微柱以及不同纵横比的基板。
>兼容高分辨率显微镜。
易于观察细胞及其对微柱变形的影响

各种微柱阵列并可以定制：

1、圆形PDMS微柱10 mm盖玻片：

标准尺寸：24 mm圆形盖玻片（约170μm厚度）
设计：直径为5um； 中心到中心的距离为7um
三种高度可供选择：2um，6um和12um

2、带状柱子的盖玻片：

在相同的盖玻片上，有两个大小不一的微柱状带状分布（厚度为1毫米）

设计带1：直径为4um； 中心到中心的距离为8um

设计带2：直径为2um； 中心到中心的距离为4um

两种高度可供选择：2um和6um

3、方形微柱盖玻片
设计：直径7.5um； 微柱之间的距离为20um
三种高度可供选择：2um，6um和12um

4、可定制的直径、高度、间距

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5、各种生物力学设备

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