微图案细胞有丝分裂高通量跟踪表征系统，高通量细胞有丝分裂跟踪表征系统

MITosis高通量细胞有丝分裂跟踪表征系统

在一个平台内处理所有必要的图像处理步骤，以检测和分析通过有丝分裂接种在微图案上的单个细胞。

通过使用延时荧光显微镜对活细胞进行可重复的分析，微图案的使用已经改变了动态生物过程的研究。 借助微图案，可以对数千个单个细胞进行高效并行成像，从而使该方法适合筛选项目。

对微模式上的单个有丝分裂细胞进行高通量分析，从而准确有效地允许从延时记录中自动确定纺锤体定位。

有丝分裂期间发生的动态事件，包括主轴定位，可以使用延时显微镜进行忠实监测。 纺锤体定位是动物发育和组织稳态过程中细胞分裂轴正确定位的基础。 在无脊椎动物模型系统中进行的正向遗传和功能基因组筛选导致鉴定出被证明广泛需要纺锤体定位的成分，包括在人类细胞中。 相比之下，直接在哺乳动物细胞中进行筛选以识别对该过程重要的基因的筛选较少，并且没有一个筛选依赖于对活细胞的监测。 因此，很可能尚未完了解控制哺乳动物系统中纺锤体定位的机制。 为了这一空白，我们提供了一个基于 siRNA 的屏幕，用于使用延时显微镜在人类细胞中定位中期纺锤体的新型调节器。

A：表达 mCherry::histone 2B 的单个 HeLa 细胞示例，生长在涂有纤连蛋白 Alexa fluor 555 的 L 形微图案上，并使用延时显微镜进行监测。顶部：延时显微镜实验的原始数据；时间以小时表示；底部：相应的示意图。请注意，示意图中显示的电池轮廓仅用于说明目的，并未通过实验进行监测。播种后，间期细胞在微图案上定向，使细胞核位于 L 的两个臂之间的中央。在有丝分裂中细胞变圆后，中期细胞板与 L 的臂成 ~ 45° 角定位L 形微图案。乙：在涂有 L 形微图案的 96 孔板中生长的细胞视野示例，使用延时显微镜进行监测；时间以小时表示。在较低放大倍率视图中用蓝色插图突出显示的区域在下方放大，以说明必须由 TRACMIT 区分的不同类别的细胞：绿色（可分析）：细胞正确定位在微图案上并在记录期间分裂；红色 [ 1 ]，空：微图案上没有细胞；红色 [ 2 ]，拥挤：微图案上有一个以上的细胞；红色 [ 3 ]，错误位置：L 的一只手臂上的细胞；红色 [ 4 ]，不分裂：细胞在记录过程中不分裂。插图中的比例尺 = 10μm

MITosis高通量细胞有丝分裂跟踪表征系统